聚合酶链反应：基本协议加上故障排除和优化策略

在生物科学，有技术进步的纪律弹射到发现的黄金年龄。例如，微生物学领域的转化与安东·范·列文虎克的显微镜，它允许科学家们想象的首次原核生物的到来。聚合酶链反应（PCR）的发展是一个创新，改变其影响跨越无数的分支学科，在生物分子科学当然。理论的过程概述了由Keppe和同事在1971年，然而，它是14年，直到完整的PCR过程描述和实验由Kary穆利斯应用，而在鲸鱼座公司于1985年。自动化和完善这一技术进步与引进菌嗜水生 ，因此得名Taq DNA聚合酶的热稳定的DNA聚合酶。

PCR是1鲍威RFUL扩增技术，可以产生一个特定的DNA（即扩增）段供应充足，只有少量的起始原料（即模板DNA或靶序列）。虽然简单，一般无故障，也有复杂的化学反应产生的杂散结果的陷阱。 PCR扩增失败时，它可以导致许多大小不等的非特异性的DNA琼脂糖凝胶带梯子或涂片中出现的产品。有时，没有产品形成所有。另一个潜在的问题发生突变时无意中引入的扩增，在PCR产物的异构人口。 PCR扩增失败可以成为令人沮丧的，除非耐心和细心的故障排除理清和解决的问题（S）。该协议概述了PCR技术的基本原则，提供了一种方法，这将导致大多数靶序列的扩增，并提出了优化反应的战略。按照这样的PCR指南，STudents应该能够：

• 设立常规PCR实验反应和热循环条件
• 了解各种反应元件的功能及其在PCR实验的整体效果
• 设计和优化为任何DNA模板的PCR实验
• 失败的PCR实验疑难解答