JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Biology

كهرباء خالية من الحمض النووي متسلسل وعزل بروتين

Published: May 15th, 2012

DOI:

10.3791/4202

1CUBRC, Inc., 2Department of Microbiology and Immunology, State University of New York at Buffalo, School of Medicine and Biomedical Sciences

مسببات الأمراض التقليدية والناشئة، مثل كولاي Enterohemorrhagic (EHEC)، طاعون يرسينيا، أو الأمراض البريونية المستندة إلى مصدر قلق كبير بالنسبة للحكومات والصناعات والمهن الطبية في جميع أنحاء العالم. على سبيل المثال، EHECs، جنبا إلى جنب مع الشغيلة، هي المسؤولة عن وفاة ما يقرب من 325000 طفل كل عام، وتنتشر بشكل خاص في العالم النامي حيث المختبرات لتحديد الهوية، وشائع في الولايات المتحدة، غير متوفرة 1. تطوير وتوزيع منخفضة التكلفة، ويمكن على الصعيد الميداني، نقطة من الرعاية أدوات للمساعدة في التعرف السريع و / أو تشخيص مسببات الأمراض أو علامات المرض تغير بشكل كبير تطور المرض والتشخيص للمرضى. قمنا بتطوير أداة لعزل الأحماض النووية والبروتينات من عينة بواسطة الصلبة مرحلة الاستخراج (SPE) من دون كهرباء أو يرتبط بها من معدات المختبرات 2. يمكن استخدام الجزيئات معزولة عن diagnoالهيئة العامة للاستعلامات سواء في المختبر أو إلى الأمام باستخدام الميدانية نقطة من الرعاية المنصات. الأهم من ذلك، هذا الأسلوب يوفر للمقارنة المباشر للحامض النووي وبيانات بروتين من عينة من الامم المتحدة والانقسام، وتقدم الثقة من خلال التثبت من التحليل الجيني والبروتين.

أداة لدينا العزلة يستخدم معيار الصناعة لالصلبة مرحلة العزلة الحمض النووي، والتكنولوجيا الازدهار، الذي يعزل الأحماض النووية من محلول ملحي chaotropic، وعادة ما جوانيداين الفصيلة، من خلال الربط إلى السيليكا المستندة إلى جزيئات أو 3 مرشحات. ويستخدم CUBRC في الملكية كيمياء استخراج الصلبة مرحلة لتنقية البروتين من الحلول ملح chaotropic، في هذه الحالة، من النفايات أو من خلال تدفق، بعد عزل الحمض النووي 4.

من قبل التعبئة والتغليف جيدا تتميز كيمياء في منصة صغيرة وغير مكلفة وبسيطة، لقد ولدت لدينا نظام محمول للحامض النووي واستخراج البروتين التي يمكن القيام بها في ظل فارiety من الشروط. الأحماض النووية المعزولة في حالة مستقرة ويمكن أن ينتقل إلى وضع يمكنها من حيث القوة هو متاح لتضخيم PCR بينما يمكن على الفور محتوى البروتين يمكن تحليلها بواسطة باليد أو غيرها من المقايسات المناعية مقرها. ويمكن التعرف السريع على علامات مرض في مجال تغير بشكل ملحوظ نتيجة للمريض من خلال توجيه مسار السليم للعلاج في مرحلة مبكرة من تطور المرض. الأداة والطريقة الموصوفة هي مناسبة للاستخدام مع وكيل أي عمليا المعدية وتوفر للمستخدم التكرار نوع من التحليلات المتعددة جزيء في الوقت ذاته من عبء لوجستية.

Tags

63

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved