Abstract
Biology
Tradisjonelle og nye patogener som Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC), Yersinia pestis eller prion-baserte sykdommer er av stor betydning for regjeringer, industrier og medisinske fagfolk verden over. For eksempel, EHECs, kombinert med Shigella, er ansvarlig for drapene på ca 325 000 barn hvert år, og er særlig utbredt i den tredje verden hvor laboratorie-basert identifisering, vanlig i USA, er utilgjengelig en. Utvikling og distribusjon av lave kostnader, kan felt-basert, point-of-care verktøy for å hjelpe til med rask identifisering og / eller diagnose av patogener eller sykdomsmarkører dramatisk endre sykdomsutvikling og pasient prognose. Vi har utviklet et verktøy for å isolere nukleinsyrer og proteiner fra en prøve av solid-fase ekstraksjon (SPE) uten strøm eller tilknyttet laboratorieutstyr to. De isolerte makromolekyler kan brukes til diagnosesis enten i en fremskutt lab eller bruke feltbaserte point-of-care plattformer. Viktigere, gir denne metoden for direkte sammenligning av nukleinsyre-og protein data fra en un-split prøven, og tilbyr en tillit gjennom bekreftelser av genomisk og proteomikk analyser.
Vår isolasjon verktøy benytter bransjestandard for fast-fase nukleinsyre isolasjon, bommen teknologien, som isolerer nukleinsyrer fra en chaotropic salt løsning, vanligvis Guanidine isothiocyanate, gjennom binding til silika-baserte partikler eller filtre 3. CUBRC proprietære fast-fase ekstraksjon kjemi brukes til å rense protein fra chaotropic saltløsninger, i dette tilfellet fra avfall eller flyt-thru etter nukleinsyre isolasjon 4.
Ved emballasje godt karakterisert kjemi i en liten, billig og enkel plattform, har vi generert et bærbart system for nukleinsyre og protein utvinning som kan utføres under en variety forhold. De isolerte nukleinsyrer er stabile og kan transporteres til en posisjon der strøm er tilgjengelig for PCR amplifikasjon mens proteininnholdet kan umiddelbart bli analysert av håndholdt eller andre immunologiske-baserte analyser. Den raske identifisering av sykdomsmarkører i feltet kunne signifikant påvirker pasientens utfallet ved å dirigere riktig løpet av behandling på et tidligere stadium av sykdommen progresjon. Verktøyet og metoden beskrevet er egnet for bruk med alle typer smittestoff og tilbyr brukeren redundans av multi-macromolecule typen analyser samtidig redusere sitt logistiske byrde.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved