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Biology

Electricidad-libre, el ácido nucleico secuencial y aislamiento de las proteínas

Published: May 15th, 2012

DOI:

10.3791/4202

1CUBRC, Inc., 2Department of Microbiology and Immunology, State University of New York at Buffalo, School of Medicine and Biomedical Sciences

Patógenos tradicionales y emergentes, tales como Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC), Yersinia pestis, o enfermedades basadas en priones son de gran preocupación para los gobiernos, las industrias y los profesionales médicos en el mundo. Por ejemplo, EHECs, junto con Shigella, son responsables de la muerte de aproximadamente 325.000 niños cada año y son especialmente prevalentes en el mundo en desarrollo, donde el laboratorio basado en la identificación, común en los Estados Unidos, no está disponible 1. El desarrollo y la distribución de bajo costo, basados ​​en el terreno, los puntos de atención de herramientas para ayudar en la rápida identificación y / o el diagnóstico de patógenos o marcadores de enfermedad podría alterar dramáticamente la progresión de la enfermedad y el pronóstico del paciente. Hemos desarrollado una herramienta para aislar ácidos nucleicos y proteínas de una muestra por extracción en fase sólida (SPE) sin electricidad o equipos relacionados con el laboratorio 2. Las macromoléculas aisladas pueden ser utilizados para diagnósticoSIS ya sea en un laboratorio hacia adelante o utilizando sobre el terreno en el punto de atención plataformas. Es importante destacar que este método ofrece para la comparación directa de ácido nucleico y los datos de proteínas de una muestra de las Naciones Unidas-split, que ofrece una confianza a través de la corroboración de análisis genómico y proteómico.

Nuestra herramienta aislamiento utiliza el estándar de la industria en fase sólida para el aislamiento de ácidos nucleicos, la tecnología de pluma, que aísla los ácidos nucleicos a partir de una solución de sal caotrópica, usualmente isotiocianato de guanidina, a través de la unión a base de sílice partículas o los filtros 3. Patentada CUBRC de la química en fase sólida de extracción se utiliza para purificar proteínas a partir de soluciones salinas caotrópicos, en este caso, a partir de los residuos o flujo pasante tras el aislamiento de ácidos nucleicos 4.

Por embalaje bien caracterizado química en una pequeña plataforma, barato y sencillo, se han generado un sistema portátil de ácido nucleico y la extracción de proteína que puede realizarse bajo una variety de condiciones. Los ácidos nucleicos aislados son estables y pueden ser transportados a una posición donde la potencia se encuentra disponible para la amplificación por PCR, mientras que el contenido de proteína inmediatamente pueden ser analizados por mano u otros ensayos inmunológicos basados. La rápida identificación de marcadores de la enfermedad en el campo podría alterar significativamente los resultados del paciente, dirigiendo el curso de tratamiento adecuado en una etapa temprana de la progresión de la enfermedad. La herramienta y el método descrito son adecuadas para su uso con prácticamente cualquier agente infeccioso y ofrecen al usuario la redundancia de los análisis de tipo multi-macromolécula al mismo tiempo reducir su carga logística.

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Qu mica

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