JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Biology

Elektrik-Free, Sıralı Nükleik Asit ve Protein İzolasyonu

Published: May 15th, 2012

DOI:

10.3791/4202

1CUBRC, Inc., 2Department of Microbiology and Immunology, State University of New York at Buffalo, School of Medicine and Biomedical Sciences

Böyle Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC), Yersinia pestis veya prion tabanlı hastalıklar gibi geleneksel ve gelişmekte olan patojenler hükümetler, sanayi ve dünya çapında tıbbi profesyoneller için önemli bir endişe vardır. Örneğin, Shigella ile birlikte EHECs, yaklaşık 325.000 çocuk her yıl ölümünden sorumlu olan ve Amerika Birleşik Devletleri'nde yaygın laboratuar tabanlı kimlik, 1 kullanılamaz gelişmekte olan dünyada, özellikle yaygındır. Düşük maliyet geliştirme ve dağıtım, patojenler ya da hastalık belirteçleri hızlı bir şekilde tespit ve / veya tanısında yardımcı olması için alan bazlı, nokta-bakım araçlarıyla önemli ölçüde hastalığın ilerlemesine ve hastanın prognozunu değiştirebilir. Biz elektrik ya da ilgili laboratuar ekipmanları 2 olmadan katı-faz ekstraksiyon (SPE) tarafından örnek bir nükleik asitlerin ve proteinlerin izole etmek için bir araç geliştirdik. İzole makromoleküller tan için kullanılabilirileri laboratuar veya alan bazlı noktası bakım platformları kullanarak ya da sis. Önemli olarak, bu yöntem genomik ve proteomik analizi ile teyit güven sunan, nükleik asit ve bir un bölünmüş numuneden proteini verilerin doğrudan bir karşılaştırma için sağlamaktadır.

Bizim izolasyon aracı silika bazlı parçacıkları veya filtreler 3 bağlanarak yoluyla chaotropic tuz çözeltisi, genellikle guanidin izotiyosiyanat, nükleik asitlerin izole katı faz nükleik asit izolasyonu için endüstri standardı, BOOM teknolojisi kullanır. CUBRC tescilli katı-faz ekstraksiyon kimyası nükleik asit izolasyonu 4 takiben atık veya akış-thru gelen, bu durumda, chaotropic tuz çözeltileri protein arındırmak için kullanılır.

Ambalaj tarafından küçük, ucuz ve basit bir platform haline kimyaları iyi karakterize, biz var altında yapılabilir nükleik asit ve protein ekstraksiyonu için taşınabilir bir sistem yarattıkoşullar iety. İzole nükleik asitler stabildir ve protein içeriği hemen tutulan elle veya diğer immünolojik bazlı analizleri ile analiz edilebilir, güç PCR amplifikasyonu için mevcut olan bir pozisyona taşınabilmektedir. Alanda hastalık belirteçlerinin hızlı tespiti önemli hastalığın ilerlemesi daha erken bir aşamada tedavi uygun ders yönlendirerek hastanın sonucu değiştirebilir. Tarif aracı ve yöntemi hemen her enfeksiyöz ajan ile kullanım için uygundur ve aynı zamanda onların lojistik yükünü azaltırken, kullanıcı çoklu makromolekül tip analizlerin artıklık sunuyoruz.

Tags

Chemistry

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved