A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Biology
Pattedyr næse er en multi-funktionel orgel med indviklede interne strukturer. Næsehulen er foret med forskellige epitheler såsom olfaktoriske, luftveje og pladeepitel, der afviger markant i anatomiske steder, morfologi, og funktioner. Hos voksne mus, er næsen dækket med forskellige kranieknogler, begrænser eksperimentel adgang til interne strukturer, især i den bageste som den i hovedsagen lugtepithelet (MOE). Her beskriver vi en effektiv metode til opnåelse af næsten hele og intakt nasale væv med konserverede anatomisk organisation. Brug kirurgiske redskaber under et dissektionsmikroskop, vi sekventielt fjerne kraniet knogler omkring den nasale væv. Denne procedure kan udføres på begge paraformaldehydet-faste og frisk dissekeret, flået mus hoveder. Hele udbening tager ca 20-30 min, hvilket er betydeligt kortere end den eksperimentelle tid, der kræves til konventionel kemisk-baserede deforkalkning. Derudover præsenterer vi en nem metode til at fjerne luftbobler fanget mellem turbinates, som er afgørende for at opnå intakte tynde vandrette eller koronale eller sagittale sektioner fra den nasale væv forberedelse. Nasal væv fremstillet ved hjælp af vores metode kan anvendes til hel mount observation af hele epithel, samt morfologiske, immuncytokemiske, RNA in situ hybridisering og fysiologiske studier, især i studier, hvor region-specifik undersøgelse og sammenligning er af interesse.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved