En effektiv Manuell utbeining metode for å forberede Intakt Mouse Nasal Tissue med bevart Anatomisk Organization

Pattedyr nese er en multi-funksjonelle organ med intrikate interne strukturer. Nesehulen er foret med ulike epitel som olfactory, luftveiene og plateepitel epitel som avviker markant i andre anatomiske områder, morfologi og funksjoner. I voksen mus, er nesen dekket med ulike skallen bein, noe som begrenser eksperimentell tilgang til interne strukturer, spesielt de i bakre som den viktigste lukteepitelet (MOE). Her beskriver vi en effektiv metode for å skaffe nesten hele og intakte nasal vev med bevart anatomisk organisasjon. Ved hjelp av kirurgiske verktøy under et dissekere mikroskop, vi sekvensielt fjerne skallen bein rundt nasal vev. Denne prosedyren kan utføres på begge paraformaldehyde-faste og ferske dissekert, flådd mus hoder. Hele prosedyren tar utbeiningen omtrent 20-30 min, som er vesentlig kortere enn den eksperimentelle tiden som kreves for konvensjonell kjemisk de-baserteforkalkninger. I tillegg presenterer vi en enkel metode for å fjerne luftbobler fanget mellom nesemusling, som er kritisk for å oppnå intakte tynne horisontale eller koronale eller sagittal seksjoner fra nasal vev forberedelse. Nasal vev fremstilt ved å anvende vår metode kan brukes til hel montere observasjon av hele epitel, samt morfologiske, immuncytokjemisk, RNA in situ hybridisering, og fysiologiske studier, spesielt i studier hvor region-spesifikke undersøkelse og sammenligning er av interesse.