A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Biology
Den däggdjur näsa är en multi-fungerande organ med intrikata inre strukturer. Näshålan är fodrad med olika epitel såsom lukt, andningsorganen och skivepitel som skiljer sig markant i anatomiska platser, morfologi, och funktioner. I vuxna möss, är näsan täckt med olika skallben, begränsar experimentell tillgång till interna strukturer, särskilt i den bakre som den viktigaste luktepitel (MOE). Här beskriver vi en effektiv metod för att erhålla nästan hela och intakta nasala vävnader med bevarade anatomiska organisation. Använda kirurgiska verktyg under ett dissekera mikroskop, tar vi sekventiellt skallben omger nasal vävnad. Denna procedur kan utföras på båda paraformaldehydfixerade och nyligen dissekeras, flådda mus huvuden. Hela urbening proceduren tar ca 20-30 min, vilket är betydligt kortare än den experimentella tid som krävs för konventionell kemisk-baserade deförkalkning. Dessutom presenterar vi en enkel metod för att avlägsna luftbubblor fastnar mellan turbinates, vilket är avgörande för att erhålla intakta tunna horisontella eller koronala eller sagittal avsnitt från nasal vävnad förberedelse. Nasal vävnad framställd med hjälp av vår metod kan användas för hela montera observation av hela epitelet, samt morfologisk, immuncytokemiska, RNA in situ hybridisering, och fysiologiska undersökningar, särskilt i studier där region-specifik undersökning och jämförelse är av intresse.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved