Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Representative Results
Discussion
Acknowledgements
Materials
References
Medicine
1차 성우 성안 성액 제노이식은 침투 성장을 재구성하고 탈수소 효소 I 돌연변이를 이소염시분해합니다.
악성 글리오마스는 뚜렷한 임상 및 분자 특징을 가진 고도로 침입된 신경교 신생물의 이질적인 그룹을 구성합니다. 1 차 성 치열 교정 이종이식은 전임상 동물 모델에서 악성 신경종 아류형의 조직 병리학 및 분자 특징을 재구성합니다.
악성 글리오마스는 뚜렷한 임상 및 분자 특징을 가진 고도로 침입된 신경교 신생물의 이질적인 그룹을 구성합니다. 1 차 성 치열 교정 이종이식은 전임상 동물 모델에서 악성 신경종 아류형의 조직 병리학 및 분자 특징을 재구성합니다. WHO가 이식 분석에서 III 및 IV 악성 글리오마를 채점하는 것을 모델링하기 위해 인간 종양 세포는 면역 손상된 마우스의 직교 부위, 뇌로 이식됩니다. 배양된 종양 세포를 활용하는 이차 이차 이식과는 대조적으로, 인간 신경교종 세포는 절제된 견본에서 해리되고 1 차적인 이종이식을 생성하기 위하여 조직 배양에 있는 이전 통로 없이 이식됩니다. 이 보고서의 절차는 종양 샘플 준비, 면각 손상된 마우스로의 두개 내 이식, 종양 이식 및 종양 수확을 위한 모니터링을 통해 수령인 동물 또는 분석으로 이어지는 통과를 위한 세부 사항을 자세히 설명합니다. 종양 세포 준비는 2 시간 필요하 고 외과 적 절차는 20 분 / 동물이 필요합니다.
악성 글리오마스는 뇌와 때때로 척수에서 발생하는 중추 신경계의 1 차 적인 신경교 종양입니다. Gliomas는 성상 세포, 올리고드로키테 또는 연골 세포에 대한 조직학적 유사성에 따라 세계 보건 기구 (WHO)에 의해 분류된 다음 악성종양의 병리학적 특징을 위해 수치적으로 등급화 (Ito IV). 가장 일반적인 히스토릭 아류형은 성상세포, 올리고드로글리오마 및 혼합 올리고아스트로시톰마스입니다. WHO 등급 II에서 IV에 대한 악성 글리오마는 현재 치료법에 대한 침습적인 성장과 재발을 특징으로합니다. 미국에서 매년, 대략 15,750명의 개별은 악성 신경종으로 진단되고 추정된 12,740명의 환자는 이 질병에 굴복합니다. 이 통계는 악성 글리오마의 특히 치명적인 특성과 향상된 치료 효능에 대한 중요한 필요성을 강조합니다.
암 모델은 종양 생물학 및 치료를 조사하기 위해 필수적입니다. 인간 암 세포주 체외 조작 및 생체 내 xenografting 연구 (이차 xenografts)1에대 한 중요 한 첫 번째 단계를 나타냅니다. 그러나, 표준 암 세포 배양은 이차 xenografts에서 복원되지 않을 수 있는 현상 및 genotypic 변환2-4를 겪는다5.....
1. 종양 세포 현탁액 의 준비
참고: 1차 직립성 신경교종 xenografts를 설치하고 유지하기 위해서는 환자 물질 및 동물의 사용에 대한 적절한 제도적 승인이 필요합니다. 밴더빌트 대학 의료 센터에서, 진단 목적을 위해 필요한 것을 초과하는 절제된 종양 물질은 연구 조직 저장소에 대한 환자의 동의하에 수집됩니다. 표본은 무작위 5자리 REDcap 데이터베이스 번호로 레.......
해리된 신경종 세포는 1 차적인 직교 이종 이식 선을 얻기 위하여 면역 손상한 마우스의 두뇌로 직접 이식됩니다. 각 종양 시편은 이식 전에 무작위 번호를 할당하고, 보호된 건강 정보를 제거하기 위한 탈부착 과정의 일부로 할당된다. 이를 위해 5자리 REDcap 데이터베이스 번호를 사용합니다. 도 1은 이소염 탈수소효소 1(IDH1) 돌연변이 아르기닌(132)을 히스티딘(R132H)으로 교모세포종(GBM .......
배양 세포주, 이노이식 및 유전자 조작 마우스는 진모를 모델링하는 가장 일반적인 방법이며, 각 모델 시스템에 대한 뚜렷한 이점과 한계가있다 3,13,14. 1 차성 직립 성 신경종 xenografts의 관련 이득은 확산 교모를 대표하는 잠입 성장 및 유전 변경및 배양된 신경교종 세포에서 유지하기 가 극히 어려울 수 있는 중요한 신호 메커니즘의 보존을 포함합니다. 예를 들어, isocitrate 탈수소 ?.......
우리는 분자 신경 외과 조직 은행에 대한 귀중한 연구 자료를 제공 밴더빌트 대학 의료 센터에서 환자에게 특히 빚이있다. 티슈 뱅크, 리드 C. 톰슨 MD(수석 연구원), 체리 킨나드 RN(연구 간호사), 래리 A. 피어스 MS(매니저)를 설립하고 유지 관리하는 분들께 감사드립니다. 조직학적 서비스는 밴더빌트 대학 의료 센터 (VUMC) 번역 병리학 공유 자원 (밴더빌트 잉그램 암 센터에 수여 5P30 CA068485에 의해 지원)에 의해 부분적으로 수행되었다. 이 작품은 NINDS (1R21NS070139), 버로우스 웰컴 펀드 및 VMC 개발 기금의 MKC보조금에 의해 지원되었습니다. MKC는 재향 군인 사무부, 재향 군인 보건 행정, 연구 개발 사무소, 생물 의학 실험실 연구 및 개발 보조금 1 I01 BX000744-01에 의해 지원됩니다. 내용은 재향 군인 국무부 또는 미국 정부의 견해를 나타내지 않습니다.
....| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|
Phosphate buffered saline |
Life Technologies |
14040-133 | |
|
Papain dissociation system |
Worthington Biochemical Corp. |
LK003150 | |
|
Trypan blue solution 0.4% |
Life Technologies |
15250061 | |
|
Ketamine HCl |
Obtained from institutional pharmacy or local veterinary supply company | ||
|
Xylazine HCl | |||
|
Ketoprofen | |||
|
Ophthalmic ointment | |||
|
Povidone-iodine |
Fisher Scientific |
190061617 | |
|
Cryopreservation medium and proliferation supplement |
StemCell Technologies |
05751 | |
|
0.2% Heparin sodium salt in PBS |
StemCell Technologies |
07980 | |
|
Penicillin-streptomycin |
Life Technologies |
15140-122 | |
|
Dimethyl sulfoxide |
Sigma-Aldrich |
D6250-5X10ML | |
|
NOD.Cg-Prkdcscid I/2rgtm1Wjl/SzJ mice |
The Jackson Laboratory |
005557 |
NSG mice |
|
Anti-human vimentin antibody |
Dako |
M7020 |
Use 1:200 to 1:800 |
|
Anti-human IDH1 R132H antibody |
Dianova |
DIA-H09 |
Use 1:100 to 1:400 |
|
Material |
Company |
Catalogue Number |
Comments |
|
Centrifuge with swinging bucket rotor | |||
|
Pipetter with dispensing speed control | |||
|
Disposable hemocytometer |
Fisher Scientific |
22-600-100 | |
|
Sterile surgical gloves |
Fisher Scientific |
11-388128 | |
|
Disposable gown |
Fisher Scientific |
18-567 | |
|
Surgical mask |
Fisher Scientific |
19-120-1256 | |
|
Tuberculin syringe |
BD |
305620 | |
|
Alcohol pads |
Fisher Scientific |
22-246-073 | |
|
Portable electronic scale |
Fisher Scientific |
01-919-33 | |
|
Zoom stereomicroscope | |||
|
Surgical clipper |
Stoelting |
51465 | |
|
Scalpel handle |
Fine Science Tools |
10003-12 | |
|
Scalpel blades, #10 | |||
|
Stereotaxic instrument |
Stoelting |
51730 | |
|
High-speed drill |
Stoelting |
51449 | |
| Drill bit, 0.6 mm | Stoelting | 514552 | |
|
Hamilton syringe |
Hamilton |
80336 | |
|
Autoclip, 9 mm |
BD |
427630 | |
|
Circulating water warming pad |
Kent Scientific |
TP-700 TP-1215EA | |
|
Hot bead dry sterilizer |
Kent Scientific |
INS300850 | |
|
Surgical scissors |
Fine Science Tools |
14101-14 | |
|
Fine scissors |
Fine Science Tools |
14094-11 | |
|
Spring scissors |
Fine Science Tools |
15018-10 | |
|
Dumont forceps |
Fine Science Tools |
11251-30 | |
|
Semimicro spatulas |
Fisher Scientific |
14374 | |
|
Mouse brain slicer matrix |
Zivic Instruments |
BSMAS002-1 | |
|
Cryogenic storage vials |
Fisher Scientific |
12-567-501 |
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