Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Representative Results
Discussion
Acknowledgements
Materials
References
Medicine
Злокачественные глиомы представляют собой неоднородную группу высокоинфильтративных глиальных неоплазм с различными клиническими и молекулярными особенностями. Первичные ортопедические ксенотрансплантологии подтипы гистопатологических и молекулярных новообразований в доклиниковых моделях животных.
Злокачественные глиомы представляют собой неоднородную группу высокоинфильтративных глиальных неоплазм с различными клиническими и молекулярными особенностями. Первичные ортопедические ксенотрансплантологии подтипы гистопатологических и молекулярных новообразований в доклиниковых моделях животных. Для моделирования ВОЗ III и IV классов злокачественных глиом в трансплантации анализы, человеческие опухолевые клетки ксенотрансплантированы в ортопедическое место, мозг, иммунокомпромиссных мышей. В отличие от вторичных ксенотрансплантатов, которые используют культурные опухолевые клетки, клетки глиомы человека отмежеваются от ресектированных образцов и пересажены без предварительного прохождения в культуре тканей для генерации первичных ксенотрансплантатов. Процедура в этом отчете детали подготовки образца опухоли, внутричерепной трансплантации в иммунокомпромиссных мышей, мониторинг для опухолевого прихлатения и опухоли сбора для последующего прохождения в реципиент животных или анализа. Препарат опухолевых клеток требует 2 часа, а хирургическая процедура требует 20 мин/животное.
Злокачественные глиомы являются первичными глиальными опухолями центральной нервной системы, которые возникают в головном мозге, а иногда и спинном мозге. Глиомы классифицируются Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) в соответствии с гистологическим сходством с астроцитами, олигодендроцитами или эпендимальными клетками, а затем численно градуированы (от I до IV) на патологические особенности злокачественности. Наиболее распространенными гистологическими подтипами являются астроцитомы, олигодендроглиомы и смешанные олигоастроцитомы. Злокачественные глиомы, охватывающие II-IV классы ВОЗ, характеризуются инвазивным ростом и непокорностью современных методов лечени....
1. Подготовка подвески опухолевых клеток
Примечание: Для установления и поддержания первичных ортотопических глиом ксенотрансплантатов необходимы соответствующие институциональные разрешения на использование материалов и животных пациентов. В медицинском ц.......
Диссоциированные клетки глиомы пересаживаются непосредственно в мозг ослабленных иммунитетом мышей для получения первичных ортопедических линий ксенотрансплантата. Каждому образцу опухоли присваивается рандомизированное число до трансплантации, как часть процесса деидентификац?.......
Культурные клеточные линии, ксенотранспланты и генетически модифицированные мыши являются наиболее распространенными методами моделирования глиом, и существуют различные преимущества и ограничения для каждоймодели системы 3,13,14. Соответствующие преимущества первичной глиомы.......
Мы особенно обязаны пациентам Медицинского центра Университета Вандербильта, которые предоставили бесценный исследовательский материал для Банка молекулярной нейрохирургической ткани. Мы благодарим тех, кто создал и поддерживает Tissue Bank, Reid C. Thompson MD (главный исследователь), Cherryl Kinnard RN (медсестра-исследователь) и Ларри А. Пирс MS (менеджер). Гистологические услуги были выполнены, в частности, Вандербильтского университета медицинский центр (VUMC) Переводная патология Общий ресурс (при поддержке награды 5P30 CA068485 в Вандербильт-Ингрэм онкологический центр). Эта работа была поддержана грантами MKC от NINDS (1R21NS070139), Фонда Burroughs Wellcome и....
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Phosphate buffered saline |
Life Technologies |
14040-133 | |
Papain dissociation system |
Worthington Biochemical Corp. |
LK003150 | |
Trypan blue solution 0.4% |
Life Technologies |
15250061 | |
Ketamine HCl |
Obtained from institutional pharmacy or local veterinary supply company | ||
Xylazine HCl | |||
Ketoprofen | |||
Ophthalmic ointment | |||
Povidone-iodine |
Fisher Scientific |
190061617 | |
Cryopreservation medium and proliferation supplement |
StemCell Technologies |
05751 | |
0.2% Heparin sodium salt in PBS |
StemCell Technologies |
07980 | |
Penicillin-streptomycin |
Life Technologies |
15140-122 | |
Dimethyl sulfoxide |
Sigma-Aldrich |
D6250-5X10ML | |
NOD.Cg-Prkdcscid I/2rgtm1Wjl/SzJ mice |
The Jackson Laboratory |
005557 |
NSG mice |
Anti-human vimentin antibody |
Dako |
M7020 |
Use 1:200 to 1:800 |
Anti-human IDH1 R132H antibody |
Dianova |
DIA-H09 |
Use 1:100 to 1:400 |
Material |
Company |
Catalogue Number |
Comments |
Centrifuge with swinging bucket rotor | |||
Pipetter with dispensing speed control | |||
Disposable hemocytometer |
Fisher Scientific |
22-600-100 | |
Sterile surgical gloves |
Fisher Scientific |
11-388128 | |
Disposable gown |
Fisher Scientific |
18-567 | |
Surgical mask |
Fisher Scientific |
19-120-1256 | |
Tuberculin syringe |
BD |
305620 | |
Alcohol pads |
Fisher Scientific |
22-246-073 | |
Portable electronic scale |
Fisher Scientific |
01-919-33 | |
Zoom stereomicroscope | |||
Surgical clipper |
Stoelting |
51465 | |
Scalpel handle |
Fine Science Tools |
10003-12 | |
Scalpel blades, #10 | |||
Stereotaxic instrument |
Stoelting |
51730 | |
High-speed drill |
Stoelting |
51449 | |
Drill bit, 0.6 mm | Stoelting | 514552 | |
Hamilton syringe |
Hamilton |
80336 | |
Autoclip, 9 mm |
BD |
427630 | |
Circulating water warming pad |
Kent Scientific |
TP-700 TP-1215EA | |
Hot bead dry sterilizer |
Kent Scientific |
INS300850 | |
Surgical scissors |
Fine Science Tools |
14101-14 | |
Fine scissors |
Fine Science Tools |
14094-11 | |
Spring scissors |
Fine Science Tools |
15018-10 | |
Dumont forceps |
Fine Science Tools |
11251-30 | |
Semimicro spatulas |
Fisher Scientific |
14374 | |
Mouse brain slicer matrix |
Zivic Instruments |
BSMAS002-1 | |
Cryogenic storage vials |
Fisher Scientific |
12-567-501 |
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved