Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Representative Results
Discussion
Acknowledgements
Materials
References
Neuroscience
Co-cultures represent a valuable method to study the interactions between nerves and target tissues and organs. Microfluidic systems allow co-culturing ganglia and whole developing organs or tissues in different culture media, thus representing a valuable tool for the in vitro study of the crosstalk between neurons and their targets.
支配起着器官和组织的发育,稳态和再生的关键作用。然而,这些现象背后的机制尚未很好地理解爱好。特别是,在神经支配牙齿发育和再生的作用被忽略。
几个在体内的研究已经在多种动物模型的发展和修复过程提供了有关牙齿组织的神经支配的模式的重要信息。然而,大多数这些方法不是最优的,突出的神经纤维和靶器官和组织之间的相互作用的分子基础。
共培养物构成一个有价值的方法进行调查,并操纵一个受控和隔离的环境神经纤维和齿之间的相互作用。在过去的几十年中,使用相同的培养基中常规共培养物已进行很短的时间( 例如 ,2天)研究制定对感觉神经纤维口腔和牙齿组织的吸引力和排斥力的影响。但是,延长培养期需要调查支配牙齿形态发生和细胞分化的影响。
微流体系统允许共培养的神经元和不同类型的细胞在它们的合适的培养基。我们最近证明,三叉神经节(TG)和牙齿能够存活的很长一段时间时,共培养在微流体装置,并且它们在这些条件下保持它们显示在体内同一神经支配模式。
在此基础上,我们将描述如何分离和共培养显影三叉神经节和牙胚在微流体的共培养system.This协议描述了一个简单而灵活的方式来共培养神经节/神经和靶组织,并研究的作用在对照这种相互作用的特定分子olled和孤立的环境。
支配起着器官和组织1,2的发育,稳态和再生的关键作用。此外,支配参与干细胞增殖,动员和分化3的调节- 5。实际上,实现了在颜面部复杂的组织最近的研究已经表明,唾液的发育和再生腺体6,7-期间副交感神经是必要的上皮的祖细胞的功能。类似地,已经证明,神经支配是必要的味蕾8的开发和维护- 11。因此,为了分析如牙神经支配在其他重要的口面部的器官和组织的发展却忽视的作用是很重要的。
尽管成年齿的丰富的神经支配的,相反于主体,开发板的所有其它器官和组织平齿开始在最早产后阶段进行支配。牙齿作为发展的口腔外胚层和中颅神经嵴源性间充质顺序和相互交流的结果。这些相互作用产生的上皮衍生成釉细胞和间充质来源的牙本质细胞,它们负责牙釉质和牙本质,分别为12的形成。从颈上神经节三叉神经节和交感神经感觉神经支配牙齿的成人13 - 15。在胚胎发生期间,神经纤维从向显影牙胚三叉神经节项目发出并逐步包围他们,但他们不渗透到牙乳头间质13。神经纤维进入牙髓间充质在与成牙本质细胞分化和牙本质基质沉积16关联更先进的发展阶段。牙髓的神经支配是并发症eted不久后在口腔中13牙齿萌出。先前的研究已经表明,各种脑信号和神经营养蛋白牙胚16期间参与神经支配的调....
Name | Company | Catalog Number | Comments |
AXIS Axon Isolation Devices | Millipore | AX15010-TC | Microchannels of different lenght are available |
Laminin | Sigma Aldrich | L2020 | |
Neurobasal | Gibco | 21103-049 | |
B27 | Gibco | 17504 | |
Recombinant Mouse beta-NGF | R&D Systems | 1156-NG-100 | Human and Rat beta-NGF (R&D Systems) are equivalent |
DMEM-F12 | Gibco | 11320-033 |
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