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Neuroscience

Microfluidic सह संस्कृति उपकरणों का प्रयोग करना टूथ रोगाणु INNERVATION विकास का विश्लेषण

Published: August 14th, 2015

DOI:

10.3791/53114

1Institute of Oral Biology, Unit of Orofacial Development and Regeneration, University of Zurich

Co-cultures represent a valuable method to study the interactions between nerves and target tissues and organs. Microfluidic systems allow co-culturing ganglia and whole developing organs or tissues in different culture media, thus representing a valuable tool for the in vitro study of the crosstalk between neurons and their targets.

INNERVATION अंगों और ऊतकों के विकास, homeostasis और उत्थान में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। हालांकि, इन घटनाओं अंतर्निहित तंत्र अच्छी तरह से अभी तक समझ नहीं रहे हैं। विशेष रूप से, दांत विकास और उत्थान में तंत्रिका वितरण की भूमिका उपेक्षित है।

Vivo अध्ययन में कई विभिन्न पशु मॉडल के विकास और मरम्मत की प्रक्रिया के दौरान दंत ऊतकों के विन्यास के पैटर्न के बारे में महत्वपूर्ण जानकारी उपलब्ध कराई है। हालांकि, इन तरीकों में से सबसे तंत्रिका तंतुओं और लक्ष्य अंगों और ऊतकों के बीच बातचीत के आणविक आधार उजागर करने के लिए इष्टतम नहीं कर रहे हैं।

सह संस्कृतियों की जांच करेंगे और एक नियंत्रित और अलग वातावरण में तंत्रिका तंतुओं और दांतों के बीच बातचीत में हेरफेर करने के लिए एक मूल्यवान विधि का गठन। पिछले दशकों में, एक ही संस्कृति के माध्यम का उपयोग कर पारंपरिक सह संस्कृतियों बहुत ही कम अवधि के लिए प्रदर्शन किया गया है (उदाहरण के लिए, दो दिन)संवेदी तंत्रिका तंतुओं पर मौखिक और दंत चिकित्सा के ऊतकों के विकास की आकर्षक या प्रतिकारक प्रभाव की जांच करने के लिए। हालांकि, संस्कृति अवधि के विस्तार के दांत morphogenesis और cytodifferentiation पर स्फूर्तिदान के प्रभाव की जांच करने के लिए आवश्यक है।

Microfluidics सिस्टम को उनके उपयुक्त संस्कृति मीडिया में न्यूरॉन्स और विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं के सह संस्कृतियों अनुमति देते हैं। हमने हाल ही में त्रिपृष्ठी गैन्ग्लिया (टीजी) और दांतों के समय की एक लंबी अवधि के लिए जीवित करने में सक्षम हैं दिखा दिया है कि जब सह सुसंस्कृत microfluidic उपकरणों में, और वे इन परिस्थितियों में वे vivo में पता चलता है कि एक ही तंत्रिका वितरण पैटर्न का कहना है कि।

इस आधार पर, हम अलग करने और एक microfluidic सह संस्कृति system.This प्रोटोकॉल में त्रिपृष्ठी ganglia और दांत कीटाणुओं के विकास सह संस्कृति एक सरल और लचीला तरीका करने के लिए सह संस्कृति गैन्ग्लिया / नसों और लक्ष्य ऊतकों और वर्णन करने के लिए कैसे का वर्णन भूमिकाओं अध्ययन करने के लिए एक contr में इस तरह की बातचीत पर की विशिष्ट अणुओंolled और अलग वातावरण।

INNERVATION अंगों और ऊतकों 1,2 के विकास, homeostasis और उत्थान में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। 5 - इसके अलावा, तंत्रिका वितरण स्टेम सेल प्रसार, जुटाना और भेदभाव 3 के नियमन में शामिल है। दरअसल, orofacial परिसर के ऊतकों में एहसास हुआ कि हाल के अध्ययनों से परानुकंपी नसों लार के विकास और उत्थान 6,7 ग्रंथियों के दौरान उपकला मूल कोशिकाओं समारोह के लिए आवश्यक हैं कि पता चला है। 11 - इसी तरह, यह तंत्रिका वितरण स्वाद 8 के विकास और रखरखाव के लिए आवश्यक है कि प्रदर्शन किया गया है। इस प्रकार, यह इस तरह के दांत के रूप में अन्य महत्वपूर्ण orofacial अंगों और ऊतकों के विकास में तंत्रिका वितरण की अभी तक उपेक्षित भूमिक....

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सभी चूहों स्विस पशु कल्याण कानून को और केंटन पशु चिकित्सा कार्यालय, ज्यूरिख के नियमों के अनुपालन में अनुसार बनाए रखा और संभाल रहे थे।

विच्छेदन सामग्री, संस्कृति मीडिया, microfluidic उपकरणों की 1. तैय?.......

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इन परिणामों से अलग त्रिपृष्ठी गैन्ग्लिया पृथक दांत कीटाणुओं के विकास microfluidic युक्ति के दूसरे डिब्बे में समय की एक लंबी अवधि के लिए निरंतर है कि, के अलावा, microfluidic डिवाइस के एक डिब्बे में वृद्धि और कर सकते हैं?.......

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दांत विन्यास की इन विट्रो अध्ययन में पिछले त्रिपृष्ठी गैन्ग्लिया और दंत चिकित्सा के ऊतकों या कोशिकाओं 26,28,29 के पारंपरिक सह संस्कृतियों पर आधारित थे। ये अध्ययन मुख्य रूप से संवेदी एक्सोन 38.......

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The work was funded by the University of Zurich. The authors would like to thank Estrela Neto and Dr. Meriem Lamghari for helping in establishing the co-culture conditions.

....

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NameCompanyCatalog NumberComments
AXIS Axon Isolation DevicesMilliporeAX15010-TCMicrochannels of different lenght are available
LamininSigma AldrichL2020
NeurobasalGibco21103-049
B27Gibco17504
Recombinant Mouse beta-NGFR&D Systems1156-NG-100Human and Rat beta-NGF (R&D Systems) are equivalent
DMEM-F12Gibco11320-033

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