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Bioengineering

कई रंगों के साथ उच्च गति से संरचित रोशनी TIRF माइक्रोस्कोपी के लिए एक गाइड

Published: May 30th, 2016

DOI:

10.3791/53988

1Department of Chemical Engineering and Biotechnology, University of Cambridge

संरचित रोशनी माइक्रोस्कोपी (सिम) के साथ ऑप्टिकल सुपर संकल्प इमेजिंग रासायनिक और जैव चिकित्सा विज्ञान में आणविक स्तर पर प्रक्रियाओं के दृश्य के लिए एक महत्वपूर्ण तकनीक है। हालांकि वाणिज्यिक सिम सिस्टम उपलब्ध हैं, सिस्टम है कि कस्टम वाणिज्यिक प्रणालियों मात कर सकते हैं प्रयोगशाला में तैयार कर रहे हैं, बाद में आम तौर पर इस्तेमाल करते हैं और सामान्य प्रयोजन के आवेदनों की आसानी के लिए, दोनों इमेजिंग निष्ठा और गति के मामले में बनाया गया है। यह लेख एक सिम प्रणाली कुल आंतरिक प्रतिबिंब (TIR) ​​रोशनी का उपयोग करता है और एक संकल्प 100 एनएम तक पहुंचने में तीन रंगों में 10 हर्ट्ज के लिए ऊपर में इमेजिंग के लिए सक्षम है कि निर्माण के लिए एक में गहराई से गाइड प्रस्तुत करता है। सिम और TIRF के संयोजन के कारण, प्रणाली प्रतिद्वंद्वी प्रौद्योगिकियों की तुलना में बेहतर छवि के विपरीत है। इन विशेषताओं को प्राप्त करने के लिए, कई ऑप्टिकल तत्वों सभी उपलब्ध उत्तेजना wav के लिए रोशनी प्रकाश का ध्रुवीकरण राज्य और स्थानिक संरचना पर स्वचालित नियंत्रण सक्षम करने के लिए इस्तेमाल कर रहे हैंelengths। हार्डवेयर कार्यान्वयन और नियंत्रण पर पूर्ण विवरण अधिकतम अधिग्रहण फ्रेम दर प्राप्त करने पर जोर देने के साथ उत्तेजना प्रकाश पैटर्न पीढ़ी, तरंग दैर्ध्य, ध्रुवीकरण राज्य, और कैमरा नियंत्रण के बीच तुल्यकालन प्राप्त करने के लिए दिया जाता है। प्रणाली संरेखण और जांच के लिए एक कदम दर कदम प्रोटोकॉल प्रस्तुत किया जाता है और प्राप्त संकल्प सुधार आदर्श परीक्षण नमूने पर मान्य है। वीडियो दर सुपर संकल्प इमेजिंग के लिए क्षमता जीवित कोशिकाओं के साथ प्रदर्शन किया है।

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