En enzym- og Serum-fri neural stamcelle Culture Model for EMT Investigation Egnet til Drug Discovery

Epiteliale til mesenkymale overgang (EMT) beskriver processen med epitel transdifferentiating ind mesenchyme. EMT er en grundlæggende proces under fosterudviklingen, der også ofte forekommer i glioblastom, den hyppigste maligne hjernetumor. EMT er også blevet observeret i flere carcinomer uden for hjernen, herunder brystcancer, lungecancer, coloncancer, gastrisk cancer. EMT er centralt forbundet med malignitet ved at fremme migration, invasion og metastase-dannelse. Mekanismerne i EMT-induktion er ikke fuldt forstået. Her beskriver vi et in vitro system til standardiseret isolering af corticale neurale stamceller (NSC) og efterfølgende EMT-induktion. Dette system giver fleksibilitet til at bruge enten enkelte celler eller eksplantation kultur. I dette system rotte eller mus embryonale forhjerne NSC'er dyrkes i et defineret medium, blottet for serum og enzymer. De NSC'er udtrykte Olig2 og Sox10, to transkriptionsfaktorer observeret i oligodendrocYTE precursorceller (OPCs). Med dette system interaktioner mellem FGF-, BMP- og TGF-signalering involverer Zeb1, Zeb2, og Twist2 blev observeret hvor TGFp-aktivering signifikant forøget cellemigration, hvilket antyder en synergistisk BMP- / TGFp-interaktion. Resultaterne peger på et netværk af FGF-, BMP- og TGF-signalering at være involveret i EMT induktion og vedligeholdelse. Dette modelsystem er relevant at undersøge EMT in vitro. Det er omkostningseffektiv og viser høj reproducerbarhed. Det giver også mulighed for sammenligning af forskellige forbindelser med hensyn til deres migration reaktioner (kvantitativ måling af afstand), og high-throughput screening af forbindelser til at inhibere eller forøge EMT (kvalitativ måling). Modellen er derfor velegnet til at teste drug biblioteker for stoffer, der påvirker EMT.