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Bioengineering

Correlative प्रकाश और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी क्वांटम डॉट नैनोकणों का उपयोग

Published: August 7th, 2016

DOI:

10.3791/54307

1South Western Sydney Clinical School, Faculty of Medicine, University of New South Wales Australia, 2School of Medicine, Western Sydney University, 3Correlative Microscopy Group, Ingham Institute for Applied Medical Research, 4Electron Microscopy Laboratory, Department of Anatomical Pathology, Sydney South West Pathology Service, New South Wales Health Pathology, 5School of Medical Sciences, Faculty of Medicine, University of New South Wales Australia

एक विधि का वर्णन किया है जिसके तहत क्वांटम डॉट (G) नैनोकणों widefield प्रतिदीप्ति प्रकाश माइक्रोस्कोपी और संचरण इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (मंदिर) का उपयोग मानव विकृति ऊतक के correlative immunocytochemical अध्ययन के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। प्रोटोकॉल हम सोमेटोस्टैटिन के लिए एक प्राथमिक एंटीबॉडी का उपयोग मानव somatostatinoma ट्यूमर के Ultrathin epoxy वर्गों immunolabeled है, एक biotinylated माध्यमिक एंटीबॉडी और streptavidin संयुग्मित 585 एनएम कैडमियम सेलेनियम (सीडीएसई) क्वांटम डॉट्स (QDs) के साथ दृश्य से पीछा प्रदर्शित करने के लिए। वर्गों एक मंदिर नमूना ग्रिड तो widefield प्रतिदीप्ति प्रकाश माइक्रोस्कोपी द्वारा अवलोकन के लिए एक गिलास स्लाइड पर रखा पर बढ़ रहे हैं। लाइट माइक्रोस्कोपी चमकीले नारंगी प्रतिदीप्ति ट्यूमर कोशिका कोशिका द्रव्य के भीतर एक बारीक पैटर्न बनाने के रूप में 585 एनएम QD लेबलिंग का पता चलता है। प्रकाश माइक्रोस्कोपी द्वारा मध्य दूरी बढ़ाई कम से कम लेबलिंग पैटर्न को आसानी से पहचाना जा सकता है और गैर विशिष्ट या पृष्ठभूमि लेबलिंग के स्तर का आकलन किया। यह एक महत्वपूर्ण हैमंदिर से immunolabeling पैटर्न के बाद व्याख्या और रूपात्मक संदर्भ के मूल्यांकन के लिए कदम। एक ही अनुभाग तो सूखी मिट और मंदिर से देखा जाता है। QD जांच अनाकार व्यक्ति स्रावी कणिकाओं में निहित सामग्री से जुड़ी करते हुए देखा गया। छवियाँ ब्याज (आरओआई) के एक ही क्षेत्र correlative विश्लेषण के लिए प्रकाश माइक्रोस्कोपी द्वारा देखा से अर्जित कर रहे हैं। प्रत्येक साधन से छवियों इसी फिर इसी क्षेत्र के मंदिर फैटी पर प्रतिदीप्ति डेटा ओवरले के लिए मिश्रित किया जा सकता है।

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