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Bioengineering

में Microengineered मानव आंत्र Villi साथ रहने का Microbiome के सह-संस्कृति एक आंत-ऑन-ए-चिप Microfluidic डिवाइस

Published: August 30th, 2016

DOI:

10.3791/54344

1Department of Biomedical Engineering, The University of Texas at Austin, 2Wyss Institute for Biologically Inspired Engineering at Harvard University, 3Vascular Biology Program, Boston Children's Hospital, Harvard Medical School, 4John A. Paulson School of Engineering and Applied Sciences, Harvard University

यहाँ, हम एक मानव आंत-ऑन-ए-चिप microphysiological डिवाइस में microengineered आंतों विल्ली के साथ बहु प्रजातियों की लंबी अवधि के सह संस्कृति मानव आंत Microbiome प्रदर्शन करने के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन है। हम एक microfluidic युक्ति है, जहां शारीरिक विकृतियों यांत्रिक और तरल पदार्थ कतरनी प्रवाह लगातार क्रमाकुंचन नकल करने के लिए लागू कर रहे हैं में आंतों लुमेन केशिका ऊतक इंटरफ़ेस पुनरावृत्ति। लुमेन microchannel में, मानव आंतों उपकला Caco -2 कोशिकाओं को एक 'रोगाणु-मुक्त' अंकुर उपकला के रूप में और छोटी आंतों विल्ली को पुनर्जीवित करने के लिए सुसंस्कृत हैं। पूर्व सुसंस्कृत माइक्रोबियल कोशिकाओं एक मेजबान के सूक्ष्म जीव पारिस्थितिकी तंत्र स्थापित करने के लिए लुमेन पक्ष में टीका कर रहे हैं। माइक्रोबियल कोशिकाओं विल्ली के शिखर सतह का पालन करने के बाद, द्रव का प्रवाह और यांत्रिक विकृतियों एक स्थिर राज्य microenvironment में जो ताजा संस्कृति के माध्यम से लगातार आपूर्ति की है और अपार बैक्टीरिया (जीवाणु के साथ ही कचरे) लगातार हटा रहे हैं उत्पादन करने के लिए फिर से शुरू कर रहे हैं। विस्तारित सह संस्कृति एफ के बादसप्ताह के दिनों ROM, कई microcolonies बेतरतीब ढंग से विल्ली के बीच स्थित हो पाए जाते हैं, और दोनों माइक्रोबियल और उपकला कोशिकाओं संस्कृति में कम से कम एक सप्ताह के लिए व्यवहार्य और कार्यात्मक रहते हैं। हमारे सह-संस्कृति प्रोटोकॉल अन्य मेजबान Microbiome पारिस्थितिक तंत्र विभिन्न मानव अंगों में पाया जा सकता है, जो स्वास्थ्य और रोग orchestrating में मानव Microbiome की भूमिका की इन विट्रो अध्ययन में सुविधा हो सकती है के लिए एक बहुमुखी मंच प्रदान करने के लिए अनुकूलित किया जा सकता है।

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