Совместное культивирование жизни микробиомом с Microengineered человека ворсинок кишечника в Gut-на-чипе микрожидкостных устройств

Здесь мы опишем протокол для выполнения долгосрочного сотрудничества культуры нескольких видов человеческого кишечника микробиомом с microengineered кишечных ворсинок в кишечнике человека-на-чипе microphysiological устройства. Резюмируем просвете кишечника-капиллярные интерфейс ткани в микрожидком устройстве, где физиологические механические деформации и сдвигового течения жидкости постоянно применяются для имитации перистальтику. В просвете микроканалов, кишечные эпителиальные клетки Сасо-2 человека культивируют с образованием "стерилен" ворсинок эпителия и регенерации тонкого кишечника ворсинки. Предварительно культивированный микробные клетки инокулируют в сторону светового потока, чтобы установить хост-микробных экосистему. После того, как микробные клетки прилипают к апикальной поверхности ворсинок, поток текучей среды, и механические деформации возобновили производить стационарную микросреду, в котором свежая культуральная среда постоянно подается и несвязанные бактерии (а также бактериальные отходы), непрерывно удаляются. После длительного совместного культивирования FROM дней до нескольких недель, несколько микроколонии оказываются случайным образом расположены между ворсинками, и как микробный и эпителиальные клетки остаются жизнеспособными и функциональной в течение по крайней мере, одну неделю в культуре. Наш протокол совместного культивирования может быть адаптирована для обеспечения универсальную платформу для других хост-микробиомом экосистем , которые могут быть найдены в различных человеческих органов, которые могут способствовать в пробирке изучения роли человеческого микробиомом в оркестровки здоровья и болезни.