Pinnurvalsmetoden för påvisande av humana Norovirus på ytor

A macrofoam based sampling methodology was developed and evaluated for the detection and quantification of norovirus on environmental hard surfaces.

Mänskliga norovirus är en ledande orsak till epidemin och sporadisk gastroenterit hela världen. Eftersom de flesta infektioner är antingen sprids direkt via den person-till-person rutt eller indirekt genom miljö ytor eller mat, förorenade fomiter och livlösa ytor är viktiga fordon för spridning av viruset under norovirusutbrott.

Vi utvecklade och utvärderade ett protokoll med hjälp av makroskum svabbar för detektering och typning av humana norovirus från hårda ytor. Jämfört med fiber spets kompresser eller antistatiska våtservetter, makroskum kompresser tillåter virusutvinning (intervall 1,2-33,6%) från toalettsitsen ytor på upp till 700 cm ^2. Protokollet inkluderar stegen för utvinning av viruset från bomullstopparna och ytterligare koncentration av det virala RNA med användning av centrifugeringskolonner. Totalt 127 (58,5%) av 217 pinnprover som samlats in från ytor i kryssningsfartyg och långvårdsanläggningar där norovirus gastroenterit hade varitrapporterade testat positivt för GII norovirus genom RT-qPCR. Av dessa 29 (22,8%) kunde framgångsrikt genotypas. Sammanfattningsvis, detektion av norovirus om miljö ytor använder protokollet vi utvecklat kan bidra till fastställandet av miljöföroreningar under utbrott samt detektion av virus när kliniska prover inte är tillgängliga; Det kan också underlätta övervakningen av effektiviteten i saneringsstrategier.

Mänskliga norovirus är en ledande orsak till epidemin och sporadisk akut gastroenterit i världen ^{en, två, tre.} Viruset är mycket smittsam och överföring sker genom direkt person till person interaktion eller indirekt genom kontakt med förorenat mat, vatten eller miljö ytor. Norovirus kan kasta under längre perioder och förlängd överlevnad av viruset på miljö ytor har dokumenterats ^{en, två, tre.} Under topp avlösning, är miljarder av viruspartiklar frigörs per gram avföring och ....

1. Swab Provtagning i fält

1. Använd en ren par handskar.
2. Mäta storleken på provytan utan att röra vid ytan med hjälp av ett måttband eller linjal. Försöka uppskatta det område som så exakt som möjligt och fyller i ett formulär (Supplementary Tabell 1).
3. Kontrollera pinnen kit för eventuella läckage och etikett provtransportväskor och pinnsatser.
4. Flytta pinnen tvärs över provtagningsområdet på följande sätt: en stroke i horisontell riktning, en .......

Figur 1 presenterar ett flödesschema över svabben provtagningsprotokoll. Detta protokoll består av fyra huvudsteg; 1) provsamling, 2) prov lagring och transport, 3) viralt RNA rening och koncentration och 4) RT-qPCR analys och genotypning.

Figur 1: Flödesschema i slutprotokollet för miljö yta provtagning av norovirus .......

Norovirus har en 50% humant smitt dos mellan 18 och 10 ^tre viruspartiklar ^20. Därför kan även smitta låg nivå av ytor utgör en risk för folkhälsan. Flera aspekter av pinnen provtagningsprotokoll utvärderades inklusive: 1) olika pinn material, 2) lagring skick kompresser under transport, 3) viralt RNA-koncentrationen, och 4) colifag MS2 som intern extraktion kontroll.

Tills nyligen hade endast resultatet av kompresser gjorda av bomull, polyester, ny.......

The authors have no acknowledgements.