Dissectie en coronale segment voorbereiding van de ontwikkeling van de hypofyse muis

We presenteren een protocol om te ontleden slijmachtige klieren en bereiden van hypofyse coronale secties van het ontwikkelen van muizen.

De hypofyse of hypophysis is een belangrijk endocriene orgaan afscheidende hormonen essentieel voor homeostase. Het bestaat uit twee klieren met aparte embryonale oorsprong en functies — de neurohypophysis en de adenohypophysis. De ontwikkelende muis hypofyse is klein en delicaat met een langgerekte ovale vorm. Bij voorkeur wordt een coronale sectie weer te geven van zowel de adenohypophysis als de neurohypophysis in een enkel sneetje van de hypofyse muis.

Het doel van dit protocol is te bereiken van de juiste hypofyse coronale secties met goed bewaarde weefsel architecturen van het ontwikkelen van muizen. In dit protocol beschrijven we in detail hoe te ontleden en te verwerken van de slijmachtige klieren goed van de ontwikkeling van muizen. Eerst, muizen door transcardial perfusie van formaldehyde vóór dissectie worden opgelost. Vervolgens worden drie verschillende ontleden technieken toegepast om het verkrijgen intact slijmachtige klieren afhankelijk van de leeftijd van muizen. Voor foetale muizen van embryonale dagen (E) 17,5-18,5 en pasgeborenen jaar omhoog tot 4 dagen, worden de regio van de gehele sella's waaronder het wiggenbeen, klier en trigeminus zenuwen ontleed. Voor pups worden leeftijd postnatale dagen (P) 5-14, de slijmachtige klieren verbonden met trigeminal zenuwen ontleed als een geheel. Voor muizen meer dan 3 weken oud, worden de slijmachtige klieren zorgvuldig ontleed gratis uit de omliggende weefsels. We tonen ook hoe de slijmachtige klieren insluiten in een goede richting met behulp van de omliggende weefsels als monumenten te verkrijgen die voldoen aan de coronale secties. Deze methoden zijn handig bij het analyseren van de histologische en ontwikkelingsproblemen functies van slijmachtige klieren bij de ontwikkeling van muizen.

De hypofyse of hypophysis is een belangrijk endocriene orgaan afscheidende hormonen essentieel voor homeostase^1,2. De hypofyse is anatomisch, een '' two-in-one'' structuur bestaande uit de neurohypophysis en de adenohypophysis. Die onderdelen moeten verschillende embryonale oorsprong en functie zeer verschillend. De neurohypophysis is afgeleid van de neurale ectoderm en scheidt van oxytocine en veel hormoon. De adenohypophysis is afkomstig uit de zak van Rathke en is verantwoordelijk voor het vrijkomen van hormonen waaronder groei-hormoon prolactine, schildklier - stimulerend hormoon, follikelstimulerend hormo....

C57BL/6 muizen worden gefokt in omstandigheden van specifieke pathogenen vrije. Alle dierlijke experimentele methoden zijn in overeenstemming met de richtsnoeren die zijn goedgekeurd door de Animal Care en de ethische Commissie op tweede militaire Medizinische Universität.

1. dissectie van postnatale ontwikkeling hypofyse

1. uitvoeren anesthesie: neonatale muizen (P0 - P5) plaats op crushed ijs voor het opwekken van hypothermie. Voor muizen die ouder zijn dan 5 dagen oud, injecteren .......

Dit protocol biedt een methode om te ontleden slijmachtige klieren van het ontwikkelen van muizen. Voor de neonatale muis, de hele sella regio's met de hypofyse, de trigeminus zenuwen en de onderzijde wiggenbeen werden ontleed uit vanaf de basis van de schedel. De kleine en delicate hypofyse tijdens het proces (figuur 1A) intact gebleven. Voor muizen die ouder zijn dan 5 dagen, toen de slijmachtige klieren gekoppeld aan de laterale trigeminal zenuwen waren ge.......

Voor het ontwikkelen van lymfkliertest pituitaries, is het technisch moeilijk te verkrijgen van de juiste coronale secties als gevolg van hun klein en kwetsbaar functies en unieke anatomische kenmerken^6,8. Sommige onderzoeksgroepen koos dus mid-Sagittaal secties voor het analyseren van de morfologie van embryonale en neonatale hypofyse^11,12. Hoewel de mid-Sagittaal sectie van hypofyse is ook geschikt voor.......

Dit werk werd gesteund door de subsidies van nationale Natural Science Foundation van China (31201086, 31470759 en 31671219) en Shanghai Natural Science Foundation (12ZR1436900).