Gør, afprøvning og brug af kalium Ion selektive Microelectrodes i væv skiver af voksne hjerne

Kalium ioner bidrage til hvile membranen potentiale celler og ekstracellulære K⁺ koncentration er en afgørende regulator af cellulære ophidselse. Vi beskriver hvordan man laver, kalibrere og bruge monopolære K⁺-selektive microelectrodes. Ved hjælp af sådanne elektroder kan måling af elektrisk evoked K⁺ koncentration dynamics i voksen hippocampus skiver.

Kalium ioner bidrage væsentligt til den hvilende membranen potentiale celler og ekstracellulære K⁺ koncentration er derfor en afgørende regulator af celle ophidselse. Ændret koncentrationer af ekstracellulære K⁺ påvirker den hvilende membran potentiale og cellulære ophidselse ved at flytte ligevægt mellem lukket, åben og inaktiveret stater for spænding-afhængige Ionkanaler, der ligger bag aktionspotentialet indledning og varmeledning. Derfor er det værdifuldt at direkte måle ekstracellulære K⁺ dynamics i sundheds- og syge stater. Her, vi beskriver hvordan man laver, kalibrere og bruge monopolære K⁺-selektive microelectrodes. Vi indsatte dem i voksen hippocampus hjernen skiver til at måle elektrisk evoked K⁺ koncentration dynamics. Fornuftig brug af sådanne elektroder er en vigtig del af den værktøjskasse, der er nødvendige for at evaluere cellulære og Biofysisk mekanismer, der styrer ekstracellulære K⁺ koncentrationer i nervesystemet.

Kalium ion koncentrationer er stramt reguleret i hjernen, og deres udsving øve en stærk indflydelse på den hvilende membran potentiale af alle celler. I lyset af disse kritiske bidrag er et vigtigt mål for biologi til at bestemme de cellulære og Biofysisk mekanismer, der anvendes til stramt regulere koncentrationen af K⁺ i det ekstracellulære rum i forskellige organer i kroppen^{1 , 2}. et vigtigt krav i disse undersøgelser er evnen til at måle K⁺ koncentrationer præcist. Selv om mange komponenter, som bidrager til kalium homøostase i hjernen i raske og syge stater har været identificeret

Alle dyreforsøg blev gennemført i overensstemmelse med den nationale Institute sundhed Guide til pleje og anvendelse af forsøgsdyr og blev godkendt af kanslerens dyr Forskningsudvalget ved University of California, Los Angeles. Alle mus har været opstaldet med mad og vand tilgængelig ad libitum i 12t lys-mørke omgivelser. Alle dyr var sund med ingen indlysende adfærdsmæssige ændringer, var ikke involveret i tidligere undersøgelser og blev ofret under lys cyklus. Data for eksperimenter blev indsamlet fr.......

Selektiv måling af ekstracellulære K⁺forberedt vi ion-selektiv microelectrodes belagt med en hydrofobe lag gennem silanisering af ren borsilikatglas pipetter (figur 1A). Denne belægning giver K⁺ ionophor indeholdende valinomycin for at hvile på spidsen af elektrode og tillader kun K⁺ flux gennem en smal åbning på elektrode spids (figur 1B). Efter grunding elektroder med tilbagefyldt saltopl?.......

Den metode, som vi beskriver her har tilladt os at vurdere K⁺ dynamics svar på elektrisk stimulation af Schaffer soeskende i akut hippocampus skiver fra voksne mus. Vores metode til at forberede K⁺ ion selektiv microelectrodes minder tidligere beskrevne procedurer^12,13,14,15. Dog, denne metode har fordele i forhold til alternative elektrode konfigurationer i, at det er hu.......

Khakh lab blev støttet af NIH MH104069. Den Mody lab blev støttet af NIH NS030549. J.C.O. tak NIH T32 neurale mikrokredsløb uddannelse Grant(NS058280).