Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Representative Results
Discussion
Acknowledgements
Materials
References
Neuroscience
बनाने, परीक्षण, और वयस्क मस्तिष्क के ऊतक स्लाइस में पोटेशियम आयन चयनात्मक Microelectrodes का उपयोग
पोटेशियम आयनों कोशिकाओं की शेष झिल्ली क्षमता में योगदान और extracellular K+ एकाग्रता सेलुलर उत्तेजितता का एक महत्वपूर्ण नियामक है । हम का वर्णन कैसे बनाने के लिए, जांचना और monopolar K+-चयनात्मक microelectrodes का उपयोग करें । ऐसे इलेक्ट्रोड का उपयोग वयस्क हिप्पोकैम्पस स्लाइस में विद्युत पैदा की+ एकाग्रता गतिशीलता के माप को सक्षम बनाता है.
पोटेशियम आयनों काफी कोशिकाओं के आराम झिल्ली क्षमता में योगदान और, इसलिए, extracellular K+ एकाग्रता सेल उत्तेजितता का एक महत्वपूर्ण नियामक है । extracellular K की बदल सांद्रता+ वोल्टेज पर निर्भर आयन चैनलों के लिए बंद, खुला और निष्क्रिय राज्यों के बीच equilibria स्थानांतरण द्वारा आराम झिल्ली क्षमता और सेलुलर उत्तेजितता को प्रभावित करता है कि आबाद कार्रवाई की क्षमता दीक्षा और आचरण । इसलिए, यह सीधे स्वास्थ्य और रोगग्रस्त राज्यों में extracellular K+ गतिशीलता को मापने के लिए मूल्यवान है । यहां, हम का वर्णन कैसे बनाने के लिए, जांचना और उपयोग monopolar K+-चयनात्मक microelectrodes । हम उंहें वयस्क हिप्पोकैम्पस मस्तिष्क स्लाइस में तैनात को मापने के लिए बिजली पैदा की कश्मीर+ एकाग्रता गतिशीलता । इस तरह के इलेक्ट्रोड के विवेकपूर्ण उपयोग उपकरण के लिए सेलुलर और भौतिक तंत्र का मूल्यांकन है कि तंत्रिका तंत्र में extracellular K+ सांद्रता नियंत्रण की जरूरत किट का एक महत्वपूर्ण हिस्सा है ।
पोटेशियम आयन सांद्रता कसकर मस्तिष्क में विनियमित रहे हैं, और उनके उतार चढ़ाव सभी कोशिकाओं के आराम झिल्ली क्षमता पर एक शक्तिशाली प्रभाव डालती. इन महत्वपूर्ण योगदान के प्रकाश में, जीव विज्ञान का एक महत्वपूर्ण लक्ष्य के लिए सेलुलर और जैव शारीरिक तंत्र है कि कसकर के लिए उपयोग किया जाता है निर्धारित करने के लिए है K+ शरीर के विभिन्न अंगों में extracellular अंतरिक्ष में1 की एकाग्रता को विनियमित , 2. इन अध्ययनों में एक महत्वपूर्ण आवश्यकता है K+ सांद्रता को सही तरीके से मापने की क्षमता. हालांकि कई घटक जो स्वस्थ और रोगग्रस्त राज्यों में मस्तिष्क में पोटेशियम homeostasis के लिए योगदान की पहचान की ग....
सभी पशु प्रयोगों के अनुसार राष्ट्रीय स्वास्थ्य गाइड के संस्थान की देखभाल और प्रयोगशाला जानवरों के उपयोग के लिए आयोजित किया गया और चांसलर के कैलिफोर्निया विश्वविद्यालय, लॉस एंजिल्स में पशु अनुसंधान ?.......
extracellular K के चुनिंदा माप के लिए+, हम स्वच्छ borosilicate ग्लास पिपेट के silanization के माध्यम से एक hydrophobic परत के साथ लेपित आयन चयनात्मक microelectrodes तैयार (आंकड़ा 1a). इस कोटिंग k+ ionophore युक्त valinomycin इलेक्ट्?.......
विधि है कि हम यहां का वर्णन हमें वयस्क चूहों से तीव्र हिप्पोकैम्पस स्लाइस में Schaffer जमानतों की विद्युत उत्तेजना के जवाब में कश्मीर की गतिशीलता का आकलन करने की अनुमति दी है । K+ आयन चयनात्मक microelectrodes त.......
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Vibratome | DSK | Microslicer Zero 1 | |
| Mouse: C57BL/6NTac inbred mice | Taconic | Stock#B6 | |
| Microscope | Olympus | BX51 | |
| Electrode puller | Sutter | P-97 | |
| Ag/AgCl ground pellet | WPI | EP2 | |
| pCLAMP10.3 | Molecular Devices | n/a | |
| Custom microfil 28G tip | World precision instruments | CMF28G | |
| Tungsten Rod | A-M Systems | 716000 | |
| Bipolar stimulating electrodes | FHC | MX21XEW(T01) | |
| Stimulus isolator | World precision instruments | A365 | |
| Grass S88 Stimulator | Grass Instruments Company | S88 | |
| Borosilicate glass pipettes | World precision instruments | 1B150-4 | |
| A to D board | Digidata 1322A | Axon Instruments | |
| Signal Amplifier | Multiclamp 700A or 700B | Axon Instruments | |
| Headstage | CV-7B Cat 1 | Axon Instruments | |
| Patch computer | Dell | n/a | |
| Sodium Chloride | Sigma | S5886 | |
| Potassium Chloride | Sigma | P3911 | |
| HEPES | Sigma | H3375 | |
| Sodium Bicarbonate | Sigma | S5761 | |
| Sodium Phosphate Monobasic | Sigma | S0751 | |
| D-glucose | Sigma | G7528 | |
| Calcium Chloride | Sigma | 21108 | |
| Magnesium Chloride | Sigma | M8266 | |
| valinomycin | Sigma | V0627-10mg | |
| 1,2-dimethyl-3-nitrobenzene | Sigma | 40870-25ml | |
| Potassium tetrakis (4-chlorophenyl)borate | Sigma | 60591-100mg | |
| 5% dimethyldichlorosilane in heptane | Sigma | 85126-5ml | |
| TTX | Cayman Chemical Company | 14964 | |
| Hydrochloric acid | Sigma | H1758-500mL | |
| Sucrose | Sigma | S9378-5kg | |
| Pipette Micromanipulator | Sutter | MP-285 / ROE-200 / MPC-200 | |
| Objective lens | Olympus | PlanAPO 10xW |
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