作成、テスト、および成人の脳の切片でカリウム イオン選択的な電極を使用して

カリウム イオンは細胞の静止膜電位に貢献し、細胞外の K⁺濃度細胞興奮性の重要な調節因子であります。確認、調整、モノポーラ K⁺を使用する方法について説明-選択的な電極。そのような電極を使用すると、大人の海馬スライスにおける電気的誘発 K⁺濃度動態の測定ができます。

カリウム イオンは細胞の静止膜電位に貢献し、そのため、細胞外の K⁺濃度は細胞興奮性の重要な調節因子。活動電位の根底にある電位依存性イオン チャネルのクローズ、オープン、不活化状態間の平衡をシフトすることによって静止膜電位および細胞内興奮性細胞外の K⁺影響の濃度を変更発生と伝導。したがって、健康と病気にかかった状態で細胞外の K⁺のダイナミクスを直接測定する貴重なです。ここでは、確認、調整および単極 K⁺を使用する方法について述べる-選択的な電極。我々 は電気的誘発 K⁺濃度動態を測定する成体海馬スライスで展開します。そのような電極の賢い使用は神経系における細胞外の K⁺の濃度を制御する細胞および生物物理学的メカニズムを評価するために必要なツール キットの重要な部分です。

カリウム イオンの濃度が脳内で堅く調整され、それらの変動はすべての細胞の静止膜電位に強力な影響を及ぼします。これらの重要な貢献の観点から、生物学の重要な目標は、¹体のさまざまな器官の細胞外スペースでしっかりと K⁺の濃度を調節するために使用する細胞および生物物理学的メカニズムを決定することです。^,2。 これらの研究で重要な要件は、K⁺濃度を正確に測定する能力。健康と病気の状態では、脳でカリウムの恒常性に貢献する多くのコンポーネントされているが、識別された^3,4、5、さらに進行中の専門にされた性質のため抑制されていますカリウム測定用イオン選択性電極の準備。電極センサーを表す K⁺濃度の in vitro組織スライスのin vivo測定のゴールド スタンダード。

監視 K⁺のための新しいアプローチがしかし、これらは生物学的関連性の高い範囲の K⁺濃度を検出しないまたはない吟味されている完全に生体が光センサーを使用して開発中の最初の結果有....

すべての動物実験は、ケアと実験動物の使用のため国立の研究所に従って健康ガイドを実施し、カリフォルニア大学ロサンゼルス校で一等書記官の動物研究委員会によって承認されました。すべてのマウスは、12 h 光暗い環境で食料や水の利用可能な自由で収容されました。すべての動物は明らかな行動変化と健康だったが以前の研究に関与していない、ライト サイクルの犠牲になっ?.......

細胞外 K⁺の選択的測定のきれいなホウケイ酸ガラス ピペット (図 1 a) のシリル化による疎水性の層で被覆されたイオン選択性電極を作製しました。このコーティングにより、バリノマイシン電極の先端に置き、電極先端 (図 1 b) の狭い開口部を通って K⁺フラックスのみを許可するを含む K⁺イオノフ?.......

ここで説明するメソッドを使用して、K⁺大人のマウスから急性海馬スライスでシャファー側枝の電気刺激に対する応答のダイナミクスを評価するためができました。K⁺イオン選択的な電極を準備するための手法は、以前記載されている手順^12,13,14,15に似ています。ただし、このメソ.......

Khakh ラボは、NIH の MH104069 によって支えられました。モディのラボは、NIH の NS030549 によって支えられました。J.C.O. は、NIH T32 神経回路トレーニング Grant(NS058280) のおかげでください。