Å gjøre Testing og bruke kalium Ion selektive Microelectrodes i vev skiver av voksen hjernen

Kalium ioner bidrar til hvile membran potensialet i celler og ekstracellulære K⁺ konsentrasjon er en viktig regulator av mobilnettet excitability. Beskriver vi hvordan å gjøre, kalibrere og bruke monopolar K⁺-selektiv microelectrodes. Med slike elektrodene kan måling av elektrisk vakte K⁺ konsentrasjon dynamikk i voksen hippocampus skiver.

Kalium ioner betydelig bidrar til hvile membran potensialet i celler, og derfor ekstracellulære K⁺ konsentrasjon er en viktig regulator av cellen excitability. Endret konsentrasjoner ekstracellulære K⁺ påvirker hvile membran potensial og mobilnettet excitability av skiftende likevekt mellom lukket, åpen og deaktivert for spenningen-avhengige ionekanaler som ligger til grunn for handlingen potensial initiering og gjennomføring. Derfor er det verdifullt å måle direkte ekstracellulære K⁺ dynamikk i helse og syke tilstander. Her beskriver vi hvordan å gjøre, kalibrere og bruke monopolar K⁺-selektiv microelectrodes. Vi satt dem i voksen hippocampus hjernen skiver å måle elektrisk vakte K⁺ konsentrasjon dynamics. Forstandig bruk av slike elektrodene er en viktig del av verktøysett for å evaluere mobilnettet og Biofysiske mekanismer som styrer ekstracellulære K⁺ konsentrasjoner i nervesystemet.

Kalium ion konsentrasjoner er strengt regulert i hjernen, og deres svingninger utøver en mektig innflytelse på hvile membran potensialet i alle celler. I lys av disse viktige bidrag er et viktig mål for biologi å fastslå mobilnettet og Biofysiske mekanismene som brukes til å regulere tett konsentrasjonen av K⁺ på ekstracellulære plass i ulike organer av kroppen^{1 , 2}. et viktig krav i disse studiene er muligheten til å måle K⁺ konsentrasjoner nøyaktig. Selv om mange komponenter som bidrar til kalium homeostase i hjernen i friske og syke tilstander har blitt identifisert^3<....

Alle dyreforsøk ble utført i henhold til National Institute of helse Guide og bruk av forsøksdyr og ble godkjent av kansler dyr forskningsutvalg ved University of California, Los Angeles. Alle mus ble plassert med mat og vann tilgjengelig annonsen libitum i 12 h lys og mørke omgivelser. Alle dyrene var friske med ingen åpenbare atferdsendringer, var ikke involvert i tidligere studier og ble ofret under lyset syklus. Data for eksperimenter ble samlet inn fra voksen mus (6-8 uker gammel for alle eksperimenter.......

For selektiv måling ekstracellulære k⁺forberedt vi ion-selektiv microelectrodes belagt med et hydrofobe lag gjennom silanization av ren Borosilikatglass Pipetter (figur 1A). Dette belegg kan K⁺ ionophore som inneholder valinomycin for å hvile på spissen av elektroden og tillater bare K⁺ flux gjennom en smal åpning på elektroden spissen (figur 1B). Etter grunning elektrodene fylt saltvann og .......

Metoden som beskriver vi her har tillatt oss å vurdere K⁺ dynamics svar på elektrisk stimulering av Schaffer collaterals i akutt hippocampus skiver fra voksne mus. Vår metode for å forberede K⁺ ion selektive microelectrodes ligner på tidligere beskrevet prosedyrer^12,13,14,15. Denne metoden har imidlertid fordeler over alternative elektrode konfigurasjoner i at det er .......

Khakh lab ble støttet av NIH MH104069. Mody laboratoriet ble støttet av NIH NS030549. J.C.O. takk NIH T32-Grant(NS058280) for trening av Neural Microcircuits.