Abstract
Bioengineering
Glioblastom (GBM) er den vanligste, men mest dødelige, sentralnervesystemet kreften. De siste årene, har mange studier fokusert på hvordan den ekstracellulære matrisen (EFM) av unike hjernen miljøet, for eksempel hyaluronic syre (HA), forenkler GBM progresjon og invasjon. Men inkluderer de fleste i vitro kultur modeller GBM celler utenfor rammen av en ECM. Murine xenografts GBM celler brukes ofte også. Men gjør i vivo modeller det vanskelig å isolere bidrag av enkeltfunksjonene i komplekse svulst microenvironment svulst virkemåten. Her beskriver vi en HA hydrogel-basert, tredimensjonale (3D) kultur plattform som tillater forskere å endre uavhengig HA konsentrasjon og stivhet. Høy molekylvekt HA og polyetylenglykol (PEG) utgjør hydrogels, som er krysskoblet via Michael-type tillegg i nærvær av lever celler. 3D hydrogel kulturer av pasient-avledede GBM celler utstillingen levedyktighet og spredning priser så godt som eller bedre enn når kultivert som standard gliomaspheres. Hydrogel systemet kan også innlemmelse av ECM-mimetic peptider å isolere effektene av bestemt celle-ECM interaksjoner. Hydrogels er optisk gjennomsiktig slik at levende celler kan avbildes i 3D kultur. Endelig er HA hydrogel kulturer kompatibel med standard teknikker for molekylær og cellulær analyser, inkludert PCR, vestlige blotting og og kryosnitt etterfulgt av immunofluorescence flekker.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved