Forfatterne vil gjerne takke Gali Breuer for henne hjelp i video produksjon. Denne forskningen ble støttet av Israels departementet for vitenskap, teknologi & Space (grant nr. 313552), ved National Institute for Psychobiology i Israel (NIPI-208-16-17b) og av Open University Foundation.

Alle metodene som er beskrevet her er godkjent av institusjonelle Animal Care og bruk komiteen av de akademiske College Tel-Aviv-Yaffo.
1. dyr
<ol><li>Bruk pre ungdom (dvs., 3 uker gamle) Institute for Cancer Research (ICR) outbred mannlige mus.</li>
	<li>Tilfeldig mus i to like store stress gruppe (UCMS vs naiv). Bruke 15 mus per behandlingsgruppe (f.eks: Hvis det er 3 farmakologisk behandlingsgrupper bruker 90 mus samlede; 2 [UCMS vs naiv] × 3 [behandling] × 15 [mus] = ...

Utstrekning MDD er en utbredt svært ødeleggende lidelse, bare delvis adressert av gjeldende behandlingsalternativer, er vitenskapelige søken etter bedre behandlinger fortsatt spørsmålet. Sammen med innovasjoner i psykologiske teknikker kreves ekstra farmakoterapi for den store delen av pasienter som ikke svarer til eksisterende narkotika. Grundig dyremodeller for depresjon er viktig element i denne oppgaven. Slike modeller rette visninger for nyskapende antidepressiva og utvide forståelsen av etiologi av uorden. UC...

Depresjon (MDD) er en ødeleggende tilstand, som er angitt som 11th årsaken til globale byrden fra sykdom1, med en livstidsprevalens 11-16%2,3. MDD har vært forbundet med alvorlige lettere pasienter sosiale og yrkesmessige fungerer, redusert livskvalitet, mange mentale og fysiske lidelser og økt risiko for dødelighet4,5,6 , 7. det er flere effektiv farmakoterapi og psykologiske tiltak for MDD; imidlertid mer enn tredje av pasientene ikke oppnå syndsforlatelse med den eksisterende behandlingsalternativer8,9,10,11. Derfor bedre kartlegging av i Patofysiologien ved MDD og utviklingen av romanen narkotika er fortsatt er av største betydning. For å løse oppgavene vitenskapelig validert dyremodeller må benyttes.
Uforutsigbare kronisk mild stress (UCMS) er en kjent gnager paradigme brukt for å indusere depressive - og angst-lignende atferd12,13,14,15. Hovedformålet med UCMS er å generere atferdsmessige underskudd (som anhedonia og atferdsmessige fortvilelse12,15) i mus og rotter, og fremme visninger for potensielle terapeutiske farmakologiske agenter. Prosedyren ble først introdusert av Katz16 og senere utviklet av Willner17,18, gir enorme atferdsdata og nevrobiologiske resultater reminiscing depressive symptomer12. Det var opprinnelig laget for rotter og senere innkvartert på mus13,19. I prosedyren er ungdom dyrene kronisk utsatt for ulike uforutsigbare mild stressfaktorer. Deretter administreres farmakologiske midler. Atferdsmessige og biologiske indekser hentes opphører behandling. En av de mer fremtredende testene utført etter UCMS er sukrose preferanse testen (SPT). SPT er basert på Red medfødt preferanse for søtet løsning i stedet for vann og er allment anerkjent som en viktig translasjonsforskning modell for å vurdere anhedonia12,18,20, 21 (som er en kjerne symptom i menneskelig depresjon22,23).
Å skrive inn det fjerde tiåret siden introduksjonen, er UCMS brukt på mus og rotter i utallige studier. Fleste av disse studiene ansatt UCMS som en metode for å indusere depressive-lignende atferd12,13,21,24. Studier har også ansatt modellen til å generere anxiogenic effekter25,26,27,28,29. Sukrose og sakkarin er de viktigste testene brukes til å vurdere anhedonia etter UCMS12,18,30,31,32,33. Andre kjente utfallsmål som svært innlemmet i UCMS litteratur er: hale suspensjon test (TST)28,34,35, tvunget svømme test (FST)28,34 , 36 , 37 (begge måler stress coping/atferdsmessige fortvilelse), åpne feltet testen (ofte, måle utforskende atferd, angst-lignende oppførsel og locomotor aktivitet)25,28,38, forhøyet pluss labyrinten (EPM, måle angst-lignende oppførsel)25,39,40 og ytterligere tester måle depressive-lignende atferd, angst-lignende atferd, kognitiv funksjon og sosiale atferd12 . Kronisk administrasjon av Trisykliske antidepressiva (TCA, imipramin35,41,42,43, desipramine18,44,45 ), tetracyclic antidepressiva (TeCAs, maprotiline46,47, mianserin48), selektive serotoninreopptakshemmere (SSRI, fluoxetine46,47,49 , escitalopram30,50, paroxetine51,52), melatonin43,49, agomelatine53, fettsyrer amid hydrolase (FAAH) hemmer URB59754 og flere naturlige forbindelser30,37,50,55,56,57,58 har vært vist for å reversere de UCMS-indusert depressive - og angst-lignende symptomene. Samlet er disse terapeutiske effekter ikke anskaffet via akutt behandlinger12 (f.eks, paroxetine51,52, imipramin53,54,59 ,60, fluoxetine53, agomelatine53, URB59754, brofaromine60).
Stress eksponering i barndom og oppvekst er en stor risikofaktor for fremre dannelsen av MDD (blant flere andre psykiske lidelser) i voksen alder61,62,63. Hypothalamus-hypofyse-adrenalin (HPA) aksen er et større neuroendocrine system regulere de bio-atferdsmessige respons stress64. Langvarig stress i følsom neurodevelopmental perioder av barndom og oppvekst svekker likevekt av HPA aksen. Det kan provosere en tilstand av forbedret sympatisk aktivering, ubalansert reaktivitet og hypercortisolemia varer gjennom hvile tilstand; dermed gjengi personer utsatt for depresjon eller angst-relaterte psychopathologies65,66,67,68. UCMS tilstrekkelig oversetter dette patogenesen: stress program under mus ' ungdomsårene induserer en langsiktig depressive-lignende mottakelighet. Videre er atferdsmessige underskuddene indusert av UCMS, underlain av betydelige endringer i HPA axis fungerende (f.eksav forårsaker en reduksjon i hippocampus hjerne-avledet nevrotropisk faktor [BDNF; protein er sterkt involvert i likevekt den HPA axis69,70]30, eller svekke regulering av corticosterone sekresjon for blod71,72), i likhet i patofysiologien mennesker12, 50,73.
UCMS har flere løft funksjoner som modell for depresjon: f.eks (i) elicitation av anhedonia (som regnes en endophenotype av MDD23,74); (ii) UCMS kan vurdere rekke depressive-lignende atferd som atferdsdata fortvilelse, redusert sosial atferd, forverring i pels tilstand og mer34; og (iii) kronisk (2-4 uker), men ikke akutt, administrasjon av antidepressiva følgende stress eksponering kunne produsere en langvarig terapeutiske effekten parallelt effekten oppnås i menneskelige pasienter ved den samme agenter30,75 ,76,77.
Disse funksjonene styrke gyldigheten av UCMS sammenlignet med andre dyr modeller av depresjon. De FST78 og TST79 er to modeller som brukes å indusere eller vurdere depressive-lignende oppførsel. Som modeller for inducing depressive-lignende atferd har de klare mangler sammenlignet med UCMS; de ikke be langsiktige atferdsendringer og kan bare reflekterer en justering akutt stress i stedet gi varig depressive-lignende manifestasjon76.
En alternativ dyr modell av depresjon er den sosiale nederlag modellen. I motsetning til FST og TST denne modellen (som UCMS) kreve bruk av kronisk stress (id est [dvs.] tilbakevendende annet av dyret aversive sosiale møter med dominerende kolleger)76,77 , 80 , 81 , 82. Hovedfordelen av sosiale nederlag modellen er at den benytter sosial stimuli som stressorer, dermed reflekterer rollen psykososiale stress i patogenesen av menneskelig depresjon. Lik UCMS, sosiale nederlag modellen utløser langsiktige depressive-lignende atferd og neuroendocrine endringer. Igjen parallelt med UCMS, sosiale nederlag-indusert underskuddene kan reverseres via kronisk, men ikke akutt, administrasjon av antidepressiva. Total, det er stor støtte for utnyttelse av både UCMS og sosiale nederlag som pre-klinisk apparatene for å undersøke i Patofysiologien ved depresjon76,77,81,82 . Men er en stor mangel av sosiale nederlag modellen at den kan bare brukes på mannlige gnagere, som kvinner ikke vise tilstrekkelig aggressiv atferd mot hverandre83. Contrastingly, UCMS har vist å produsere flere depressive effekter på både mannlige og kvinnelige mus34.
Forutsigbar kronisk mild stress (PCMS) er en annen gnager modell som gjennomfører en diett av daglig regelmessige eksponering for tilbakeholdenhet stress28,84,85,86,87. Flere studier har vist at PCMS økt angst-lignende atferd28,87; Men, det er motstridende rapporter vis-à-vis PCMS evnen til å indusere langsiktige depressive-lignende atferd. I motsetning til UCMS, har PCMS produsert mindre tilfredsstillende resultater refererer til evnen til å indusere en anhedonic-lignende tilstand28,84,86. Dette stemmer overens med den menneskelige fenomenologi, som uforutsigbare stressfaktorer er mer skadelig enn forutsigbar de88.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Heating lamp</td>
			<td>Ikea</td>
			<td>AA-19025-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pillow</td>
			<td>Sachs</td>
			<td>EF-188B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice restrainer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Portable electronic balance (*.** g)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard rubber stopper, size 5</td>
			<td>Ancare</td>
			<td>#5.5R</td>
			<td>To avoid spillage during SPT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight open drinking tube (2.5&#34;)</td>
			<td>Ancare</td>
			<td>OT-100</td>
			<td>To avoid spillage during SPT (insert drinking tube into rubber stopper)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2% sucrose solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50ml conical centrifuge tube</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For the SPT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pre-adolescent (approximately 20-days old) ICR outbred mice</td>
			<td>Envigo</td>
			<td>Hsd:ICR (CD-1)</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the unpredictable chronic mild stress protocol for inducing anhedonia in mice

Depresjon er en svært utbredt og ødeleggende tilstand, bare delvis adressert av gjeldende farmakoterapi. Mangel på respons på behandling av mange pasienter ber trenger å utvikle nye terapeutiske alternativer og bedre forstå etiologi av uorden. Pre-klinisk modeller med translasjonsforskning fortjeneste er rudimentære for denne oppgaven. Her presenterer vi en protokoll for metoden uforutsigbare kronisk mild stress (UCMS) i mus. I denne protokollen utsatt ungdom mus kronisk for utveksling uforutsigbare mild stressfaktorer. Ligner patogenesen av depresjon hos mennesker, instigates stress eksponering i følsom løpet av mus ungdomsårene en depressiv-lignende fenotypen tydelig i voksen alder. UCMS kan brukes til visninger av antidepressiva for depressive-lignende atferd og neuromolecular indekser. Blant de mer fremtredende testene for å vurdere er depressive-lignende oppførsel i gnagere sukrose preferanse testen (SPT), som gjenspeiler anhedonia (kjernen symptom på depresjon). SPT vil også bli presentert i denne protokollen. Muligheten for UCMS å indusere anhedonia, egge langsiktige atferdsmessige underskudd og aktiverer reversering av disse underskudd ved kronisk (men ikke akutt) behandling med antidepressiva styrker protokollen gyldigheten sammenlignet med andre dyr protokoller for inducing depressive-lignende atferd.

For å bekrefte effekten av UCMS fremgangsmåten for inducing depressive-lignende underskudd, ble en manipulasjon sjekk utført. Mannlige ICR outbred mus ble randomisert til enten UCMS eller naiv forhold (4 uker, som beskrevet i protokollen 2.2). Deretter ble SPT (6 dager, som beskrevet i protokoll 4) administrert for å vurdere om mus etter under UCMS vist livsnyter underskudd. Kort tid etter, mus ble ofret og hippocampus ble dissekert ut helt for BDNF (et protein svært innblandet i Pat...

Watch this Scientific Journal Video about The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice at JoVE.com

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Her presenterer vi uforutsigbare kronisk mild stress protokollen i mus. Denne protokollen induserer en langsiktig depressive-lignende fenotypen og gjør for å vurdere effekten av antatte antidepressiva snu opptreden og neuromolecular depressive-lignende underskuddene.

Uforutsigbare kronisk Mild Stress protokollen for å indusere Anhedonia i mus

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Den største fordelen med denne teknikken er at den tilstrekkelig oversetter store nevrobiologiske og atferdsmessige egenskaper involvert i patogenesen, etiologien og behandling av depresjon. Denne metoden kan bidra til å svare på viktige spørsmål i å forstå patofysiologien til angst og depresjon og fremme utviklingen av nye farmakologiske behandlinger. Implikasjonen av denne teknikken strekker seg for behandling av depresjon, fordi det muliggjør screenings for potensielle antidepressiva mens ligner det langvarige løpet av remisjon tydelig hos menneskelige pasienter.Begynn med å fylle hjem bur med fersk sagflis, og legg til et stykke bomullsull for berikelse. Husdyr i hjemmeburet i en acclamasjonsperiode på en uke, og hold en konsekvent 12-timers lys / mørk syklus. Tillat ad libitum tilgang til gnager chow og vann.Design en fire ukers stressor diett der hver av de syv stressfaktorer brukes en gang i uken, på en annen dag hver uke. Etter en uke med acclamasjon, initiere anvendelse av stressorene på de fire uker gamle musene i UCMS-rommet. For den første stressoren, plasser mus sammen med sine hjemmeburkolleger i et tomt bur.Fyll det tomme buret med vann holdt på 24 pluss- eller minus-en grader Celsius til en dybde på en centimeter, og hold mus i det våte buret i fire timer. Overfør deretter hver mus til et eget individuelt forbigående tørkebur med en varmelampe over den, en varmepute under den og papirhåndklesengetøy. Plasser et termometer i det forbigående buret for å kontrollere at temperaturen ikke overstiger 37 grader Celsius.Hold hver mus i det forbigående buret til den er tørr og ser oppkvikket ut, og returner deretter mus til hjemmeburet med de samme motstykkene. For fuktet sagflis holdt dårlig vann på 24 pluss- eller minus-en grader Celsius inn i hjemmeburet til sagflisen er moderat dempet. Etter fire timer, tørk musene i forbigående bur.Plasser deretter musene med hjemmeburkolleger i et sterilt bur med fersk sagflis. For neste stressor, vipp buret på 45 grader mot veggen i fire timer. For Empty Cage, overfør alle fem musene sammen med sine spesifikke hjemmebur kolleger fra hjemmeburet til et tomt bur i fire timer.For den femte stressoren, overfør mus sammen med sine spesifikke hjemmeburkolleger fra hjemmeburet til et bur som ble plassert av en annen gruppe mus i en periode på minst tre dager før stressorapplikasjon. Hold mus i det ukjente buret i fire timer. For den sjette stressoren, plasser hver mus separat i et rent muserekkebånd i fire timer.Deretter returnerer du mus til hjemmeburet med de samme motstykkene. For den siste stressoren, overfør mus i hjemmeburet med sine spesifikke kolleger til UCMS-rommet. Hold lyset på i 24 sammenhengende timer.Til slutt, etter stressor søknad, returnere burene i UCMS gruppen fra UCMS rommet til boligrommet. I løpet av de fire ukene med stresseksponering, hold den naive gruppen i sine hjemmebur som ligger i boligrommet. Dagen etter opphør av UCMS-protokollen starter du administrering av antatte terapeutiske farmakologiske midler.Etter behandlingsfasen fjerner du hver mus fra hjemmeburet og plasserer den individuelt i et bur fylt med fersk sagflis og et stykke bomullsull for berikelse. Deretter forbereder du to flasker, en med destillert vann, og en annen med 2% sukroseløsning. Vei de to flaskene og sett dem i begge ender av burlokket og plasser gnagerchow mellom de to flaskene for å gi mus ad libitum tilgang til både løsninger og mat i en periode på 24, 48, 72 eller 144 timer.Etter 12 timer, eller en gang om dagen hvis testens varighet overstiger 24 timer, veie flaskene for å estimere forbruket fra hver flaske og bytte posisjonene til dysene for å motvirke muligheten for at resultatene ble forvirret av posisjonspreferanse. Til slutt, veie flaskene hver dag for å estimere forbruket fra hver flaske. UCMS-gruppen viste redusert sukrosepreferanse sammenlignet med den naive gruppen, noe som tyder på at UCMS-protokollen var effektiv for å indusere anhedonia.Videre viste UCMS-gruppen reduserte hippocampal BDNF-nivåer sammenlignet med den naive gruppen, noe som tyder på at UCMS-protokollen førte til reduksjon i hippocampal BDNF-nivåer som tydelige i menneskelig depresjon. Resultatene indikerte at UCMS saltvannsgruppen viste en signifikant reduksjon i sukrosepreferanser sammenlignet med den naive saltvannsgruppen, samt sammenlignet med både UCMS escitalopram og UCMS NHT-gruppene, noe som tyder på at både escitalopram og NHT normaliserte UCMS-indusert anhedonia. I tillegg viste UCMS saltvannsgruppen reduserte hippocampal BDNF-nivåer sammenlignet med den naive saltvannsgruppen, samt sammenlignet med både UCMS escitalopram og UCMS NHT-gruppene, noe som tyder på at både escitalopram og NHT normaliserte UCMS-indusert reduksjon i BDNF-nivåene i hippocampus.Etter denne prosedyren kan andre metoder som halefjæringstest, tvungen svømmetest og forhøyet plusslabyrint utføres. Disse testene brukes til å vurdere atferdsfortvilet samt utforskende og angst som atferd.