Чистый метод, основанный на плесень, создания эшафот бесплатный трехмерный сердечной ткани

Этот протокол описывает Роман и легко чистый метод на основе формы для создания трехмерной (3-D) сердечной ткани без дополнительных эшафот материала. Человека индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, полученных кардиомиоцитов (iPSC-CMs), сердечной фибробластов (HCFs), человека пупочную вену эндотелиальных клеток (HUVECs) изолированные и используется для создания суспензии клеток с 70% iPSC-CMs, 15% HCFs и 15% HUVECs. Они совместно культивируемых в системе ультра-низким насадку «висит капля», которая содержит микропоры для конденсации сотни сфероидов в одно время. Клетки агрегировать и спонтанно формируют избиение сфероидов после 3 дней совместного культуры. Сфероидов собирают, семенами в полости формы роман и культивировали в шейкер в инкубаторе. Сфероидов стать зрелой функциональные ткани примерно через 7 дней после посева. Результирующая многослойные ткани состоят из плавленого сфероидов с удовлетворительным структурной целостности и поведением синхронное биений. Этот новый метод имеет многообещающий потенциал воспроизводимость и экономически эффективным методом для создания инженерии тканей для лечения сердечной недостаточности в будущем.