सूक्ष्म गणना टोमोग्राफी द्वारा धारा मुक्त 3 डी प्रोटोकॉल के लिए फिक्स्ड और दाग, पूरे, मिलीमीटर पैमाने पर नमूनों की कठोर embedding

एक सौ से अधिक वर्षों के लिए, ऊतकों के ऊतकवैज्ञानिक अध्ययन चिकित्सा निदान के लिए सोने के मानक किया गया है क्योंकि प्रोटोकॉल हर ऊतक में सभी प्रकार के सेल की अनुमति देता है की पहचान की और विशेषता है । हमारी प्रयोगशाला सक्रिय रूप से एक्स-रे सूक्ष्म गणना टोमोग्राफी (माइक्रो सीटी) है कि सेलुलर संकल्प पर पूर्ण ऊतक संस्करणों के अध्ययन के लिए प्रोटोकॉल के नैदानिक शक्ति लाएगा में तकनीकी प्रगति करने के लिए काम कर रहा है (यानी, एक एक्स-रे Histo-टोमोग्राफी मोडल) । इस अंत की ओर, हम नमूना तैयारी पाइप लाइन के लिए लक्षित सुधार किया है । एक प्रमुख अनुकूलन, और वर्तमान काम का ध्यान, निश्चित और सना हुआ मिलीमीटर पैमाने पर नमूनों की कठोर embedding के लिए एक सरल तरीका है । नमूना स्थिरीकरण और correlative माइक्रो सीटी इमेजिंग के लिए प्रकाशित तरीकों में से कई आयल मोम, agarose, या शराब के रूप में तरल पदार्थ में नमूने रखने पर निर्भर करते हैं । हमारे दृष्टिकोण कस्टम प्रक्रियाओं के साथ इस काम को बढ़ाता है और एक 3-आयामी मुद्रण योग्य उपकरण के डिजाइन के लिए सीधे polyimide टयूबिंग, जो एक्स-रे के लिए अपेक्षाकृत पारदर्शी है में एक एक्रिलिक राल में नमूने एंबेड । इस के साथ साथ, नमूना तैयारी प्रक्रियाओं ०.५ से 10 मिमी व्यास, जो पूरे zebrafish लार्वा और किशोर, या अन्य जानवरों और इसी तरह के आयामों के ऊतकों के नमूने के लिए उपयुक्त होगा के लिए नमूने के लिए वर्णित हैं । अवधारणा के सबूत के रूप में, हम ढाणियो, Drosophila, Daphnia, और एक चूहा भ्रूण से नमूनों एंबेडेड है; इन नमूनों में से तीन के लिए 3 आयामी स्कैन से प्रतिनिधि छवियों को दिखाया जाता है । महत्वपूर्ण बात, हमारी कार्यप्रणाली कठोर स्थिरीकरण सहित कई लाभों की ओर जाता है, laboriously के दीर्घकालिक संरक्षण-संसाधनों बनाया, और फिर से पूछताछ नमूनों की क्षमता ।