Realtid visualisering och analys av Chondrocyte skada på grund av mekanisk belastning i helt intakt murina brosk bladsticklingar

Homeostas av ledbrosk beror på viabilityen av bosatt celler (kondrocyter). Tyvärr, mekanisk trauma kan inducera utbredd chondrocyte död, vilket kan leda till irreversibla fördelningen av gemensamt och uppkomsten av artros. Dessutom är underhåll chondrocyte bärkraft viktigt i osteokondrala transplantat förfaranden för optimal kirurgiska resultat. Vi presenterar en metod för att bedöma rumsliga omfattningen av skada/celldöd på artikulära ytan av intakt murina synovial lederna efter applicering av kontrollerad mekanisk belastning eller effekter. Denna metod kan användas i jämförande studier för att undersöka effekterna av olika mekaniska lastning regimer, olika miljöförhållanden eller genetiska manipulationer, samt olika stadier av brosk degeneration på kort - och/eller långsiktiga sårbarheten hos jordbaserad artikulära kondrocyter. Målet med det protokoll som infördes i manuskriptet är att bedöma rumsliga omfattningen av skada/celldöd på artikulära ytan av murina synovial lederna. Denna metod gör allt testa på helt intakt brosk utan att kompromissa med ursprungliga randvillkor. Dessutom tillåter det realtid visualisering av oerhört färgade artikulära kondrocyter och enda image-baserad analys av cell skada inducerad av tillämpningen av kontrollerade statisk och effekter lastning regimer. Våra representativa resultat visar att i friskt brosk bladsticklingar, rumsliga omfattning cell skada beror känsligt på belastning omfattningen och konsekvenserna intensitet. Vår metod kan lätt anpassas till undersöka effekterna av olika mekaniska lastning regimer, olika miljöförhållanden eller olika genetiska manipulationer på mekaniska sårbarhet av i situ artikulära kondrocyter.