JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Bioengineering

التعبير المستقلة الميثانول بسطورس بيشيا تستخدم تكنولوجيات إزالة القمع

Published: January 23rd, 2019

DOI:

10.3791/58589

1bisy e.U., 2Institute of Molecular Biotechnology, Technical University of Graz

والميثانول هو مصدر الكربون الراسخة ومحفِّز لإنتاج البروتين كفاءة توظيف بسطورس بيشيا (P. بسطورس) كمضيف على نطاق المشاريع المتناهية الصغر، ومختبر والصناعية. ومع ذلك، بسبب سميتها والقابلية للاشتعال، هناك رغبة في تجنب الميثانول مع الحفاظ على إنتاجية عالية بسطورس P.. يأتي مفاعل حيوي صغيرة الحجم (0.5-5 حجم العمل L) تستخدم عادة لتقييم سلالة وخصائصها إنتاج البروتين نظراً لزراعة microscale في لوحات عميقة جيدا يمكن التحكم بالكاد، أو تعتمد على معدات غالية الثمن. وعلاوة على ذلك، البروتوكولات التقليدية لزراعة وتحريض بسطورس P. أنشئت لتحريض التعبير أو الميثانول التأسيسية وحتى الآن، ووصفت أية بروتوكولات موثوقة للشاشة بسطورس P. التعبير سلالات مع المروجين ديريبريسيبلي في الزراعات موازية (الخاضعة للرقابة والمراقبة). لتبسيط هذه الزراعات الأولى لوصف ومقارنة سلالات جديدة من إنتاج البروتين، ونحن أنشأت نظاما زراعة قارورة هزة بسيطة الميثانول حرية التعبير التي تحاكي ظروف مفاعل حيوي بما في ذلك والغليسيرول بطء مستمر تغذية والرصد على الإنترنت، وبذلك يقترب الظروف الحقيقية في المفاعلات الحيوية مقارنة بمعظمها التطبيقية صغيرة الحجم الدفعي الزراعات. إلى محرك التعبير البروتين المؤتلف في P. بسطورس، مصدر الكربون قمع المروجين وطبقت فالعاصمة و فمدافع . أقراص البوليمر مع مصدر الكربون مضمن، الإفراج عن كمية ثابتة من الجلسرين، أكد معدل تغذية إيصال الطاقة اللازمة للإبقاء على المروجين النشطة مع الحفاظ على انخفاض توليد طاقة الكتلة الأحيائية.

Explore More Videos

143

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved