De onafhankelijke expressie methanol door Pichia Pastoris ambtshalve repressie technologieën in dienst

Methanol is een gevestigde koolstofbron inductor voor efficiënte eiwitproductie, Pichia pastoris (P. pastoris) in dienst als een host op micro-, lab en industriële schaal. Echter, vanwege de giftigheid en brandbaarheid is er een verlangen om te voorkomen dat methanol met behoud van de hoge productiviteit van P. pastoris. Kleinschalige bioreactor teelten (0.5-5 L werken volume) worden vaak gebruikt om te evalueren van een stam en de eiwit productie kenmerken omdat microscale teelt in diep goed platen nauwelijks kan worden gecontroleerd of afhankelijk van dure apparatuur. Bovendien, traditionele protocollen voor de teelt en de inductie van P. pastoris werden opgericht voor de constituerende expressie of methanol inductie en tot nu toe dat geen betrouwbare protocollen werden beschreven op scherm P. pastoris expressie stammen met derepressible initiatiefnemers in (gecontroleerde en bewaakte) parallelle teelten. Ter vereenvoudiging van deze eerste teelten te karakteriseren en vergelijken van nieuwe eiwit productie stammen, opgericht wij een eenvoudige schudden kolf Cultuurstelsel voor methanol vrije meningsuiting die simuleert bioreactor voorwaarden met inbegrip van een constante traag glycerol feed en online monitoring, daardoor komt dichter bij de werkelijke voorwaarden in bioreactoren in vergelijking met meestal toegepaste kleinschalige batch teelten. Onderdrukt de initiatiefnemers P_DC en P_DF werden toegepast om recombinant eiwit expressie in P. pastoris, de koolstofbron. Polymeer schijven met ingesloten koolstofbron, het vrijgeven van een constante hoeveelheid glycerol, verzekerd van een verwerkingsdebiet leveren de nodige energie voor het behoud van de initiatiefnemers actief terwijl de generatie biomassa laag.