Metanol selvstendig uttrykk av Pichia Pastoris ansette de undertrykkelse teknologi

Metanol er en veletablert karbon kilde og induser for effektiv protein produksjon ansette Pichia pastoris (P. pastoris) som vert på mikro-, lab og industriell skala. Men dens toksisitet og brannfare er det et ønske om å unngå metanol samtidig opprettholde høy produktiviteten til P. pastoris. Småskala bioreactor nærområdet (0,5-5 L volum) brukes vanligvis til å evaluere en belastning og egenskapene protein produksjon siden Mikroskala dyrking i dypt bra plater kan neppe kontrollert eller bruker dyrt utstyr. Videre ble tradisjonelle protokoller for dyrking og induksjon av P. pastoris etablert for grunnleggende uttrykk eller metanol induksjon og så langt ingen pålitelig protokollene ble beskrevet skjermen P. pastoris uttrykk stammer med derepressible arrangører i (kontrollert og overvåket) parallelle nærområdet. For å forenkle slike første lokalt for å karakterisere og sammenligne nye protein produksjon stammer, etablerte vi en enkel riste flasken dyrking system for metanol ytringsfrihet som simulerer bioreactor betingelser inkludert en konstant langsom glyserol feed og online overvåking, og dermed kommer nærmere den virkelige forholdene i bioreactors sammenlignet med mest brukte småskala satsvis i nærområdet. Undertrykt arrangører P_DC og P_DF ble brukt for å drive rekombinant protein uttrykk i P. pastoris, karbon kilde. Polymer plater med innebygd karbon kilde, slippe en konstant mengde glyserol, sikret en fôr rente levere den nødvendige energien for å opprettholde arrangørene aktive samtidig biomasse generasjon lav.