Abstract
Bioengineering
Stamcellsterapi visar en lovande framtid i regenererande skadade organ och vävnader, och cellen ark tekniken har utvecklats för att förbättra lågt retention och dålig överlevnad inom träningszonen. Dock under in vitro- byggprocessen behövs en lösning för att upprätthålla stamceller bioaktivitet och ökar cell inom cellagret snarast. Här, presenterar detta protokoll en metod för att konstruera ett multilayered cellagret med gynnsamma stamceller bioaktivitet och optimal funktion. Cell-lösa svin hjärtsäck (DPP) är utarbetad av fosfolipas en2 (PLA2) decellularization metod som cellen ark schavotten, och råtta benmärgen mesenkymala stamceller (BMSCs) är isolerade och expanderade som seedade cellerna. Tillfälliga multilayered ark cellstrukturen konstrueras genom att använda RAD16-jag peptid hydrogel. Slutligen, cellagret är odlade med en dynamisk perfusion-system för att stabilisera den tredimensionella (3D) strukturen och cellagret kunde erhållas efter en 48-timmars kultur i vitro. Detta protokoll ger en effektiv och genomförbar metod för att konstruera ett multilayered stamceller blad och cellagret skulle kunna utvecklas som en gynnsam stamceller behandling produkt i framtiden.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved