Evaluering af kolorektal cancer risiko og prævalens ved afføring DNA Integrity Detection

Den præsenterede diagnostiske FL-DNA kit er en tidsbesparende og brugervenlig metode til at bestemme den pålidelige sandsynlighed for tilstedeværelsen af kolorektal cancer læsioner.

I dag, afføring DNA kan isoleres og analyseres ved flere metoder. De lange fragmenter af DNA i afføringen kan detekteres ved en qPCR-analyse, som giver en pålidelig sandsynlighed for tilstedeværelsen af prænamplastiske eller neoplastiske kolorektale læsioner. Denne metode, kaldet fluorescens lang DNA (FL-DNA), er en hurtig, ikke-invasiv procedure, der er en forbedring af det primære forebyggelsessystem. Denne metode er baseret på evaluering af fækal DNA-integritet ved kvantitativ forstærkning af specifikke mål for genomisk DNA. Især giver evalueringen af DNA-fragmenter på over 200 bp mulighed for påvisning af patienter med kolorektal læsioner med meget høj specificitet. Dette system og alle i øjeblikket tilgængelige afførings-DNA-test præsenterer imidlertid nogle generelle spørgsmål, der skal løses (f.eks. hvor hyppigt testene skal udføres, og det optimale antal afføringsprøver, der indsamles på hvert tidspunkt for hver enkelt). Den største fordel ved FL-DNA er imidlertid muligheden for at bruge det sammen med en test, der i øjeblikket anvendes i CRC-screeningprogrammet, kendt som den immunkemiske fækal okkulte blodprøve (iFOBT). Faktisk kan begge test udføres på den samme prøve, hvilket reducerer omkostningerne og opnå en bedre forudsigelse af den endelige tilstedeværelse af kolorektal læsioner.

Kolorektal cancer (CRC) stammer fra en multi-trins^proces,hvor sund epitel langsomt udvikler sig til adenomer eller polypper, som udvikler sig til maligne karcinomer over tid¹,². På trods af CRC's høje incidensrate er der observeret en nedadgående tendens i andelen af dødsfald i løbet af det seneste årti³. Faktisk, tidlig diagnostiske værktøjer vedtaget i screening programmer har ført til tidlig påvisning og fjernelse af præ-neoplastiske adenomer eller polypper⁴. Men på grund af de forskellige tekniske grænser er ingen af disse metoder optimale. For at forbedre fø....

Patienterne blev rekrutteret på Istituto Scientifico Romagnolo per lo Studio e la Cura dei Tumori (IRST) af Meldola (FC, Italien) mellem 2013 og 2015. Inkluderede patienter blev optaget i protokol IRSTB002, godkendt af den etiske komité i IRST - IRCCS AVR (25/10/2012, ver. 1). Alle metoder blev udført i overensstemmelse med relevante retningslinjer og bestemmelser. Der blev indhentet skriftligt informeret samtykke fra alle patienter.

1. DNA-ekstraktion fra afføring

1. Brug et sæt t.......

Arbejdsprocessen for denne protokol vises i figur 1. Arbejdsprocessen indeholder to kontroltrin og forskellige handlinger i henhold til disse trinsresultater. Hvis en prøve for det første udviser uegnede betjeningsorganer, skal forstærkningen gentages. For det andet skal prøven, hvis forstærkningen hæmmes, oparbejdes fra begyndelsen eller klassificeres som ikke værdifuld.

Figur 2 viser de fluorescenskurver, der frembringes af positive og negative prøve.......

Tidligere undersøgelser har vist , at DNA-integritetsanalyse af afføring , der er udvundet ved manuelle og halvautomatiske tilgange , kan udgøre et alternativt redskab til tidlig påvisning af kolorektale læsioner^{7,8,9,10,11,12}. Molekylære, noninvasive screeningtest er blevet udviklet i årenes løb til påvisning af kol.......

Forfatterne har ingen anerkendelser.