JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Immunology and Infection

Kultur metoder til at bestemme grænsen for påvisning og overlevelse i Transport Media af Campylobacter Jejuni i Human Fecal Prøver

Published: March 10th, 2020

DOI:

10.3791/60457

1TECHLAB, Inc.

En kultur fra menneskelig afføring til diagnosticering af Campylobacter-baseredetarmsygdom tager flere dage, en ventetid, der skatter styrke af lægen og patienten. En kultur er også tilbøjelig til falske negative resultater fra tilfældigt tab af levedygtighed under prøvehåndtering, overvækst af andre fækale flora, og dårlig vækst af flere patogene Campylobacter arter på traditionelle medier. Disse problemer kan forvirre kliniske beslutninger om patientbehandling og har begrænset området fra at besvare grundlæggende spørgsmål om Campylobacter vækst og infektioner. Vi beskriver en procedure, der anslår den nedre grænse for bakterietal, der kan påvises ved en kultur, og en metode til kvantificering af C. jejunis overlevelse i medier, der anvendes til transport af denne skrøbelige organisme. Kendskab til disse oplysninger, bliver det muligt at fastsætte klinisk relevante detektiontærskler for diagnostiske tests og løse uundersøgte spørgsmål om, hvorvidt ikke-symptomatisk kolonisering er udbredt, hvis co-infektion med andre enteriske patogener er fælles, eller hvis bakteriel belastning korrelerer med symptomer eller alvorlige sequelae. Undersøgelsen omfattede også test af 1.552 prospektivt indsamlet patient diarré fækal prøver, der oprindeligt blev klassificeret af konventionel kultur og yderligere testet af et nyt enzym immunoassay. Positive og discrepant prøver blev derefter screenet af fire molekylære metoder til at tildele sand-positiv eller sand-negativ status. De fem ikke-kulturmetoder viste fuldstændig enighed om alle 48 positive og ufortensprøver, mens de ikke-kultiverede 14 (28 %). De prøver, der fejlagtigt blev identificeret ved dyrkning, omfattede 13 falske negative og 1 falsk positiv prøve. Denne grundlæggende protokol kan bruges med flere Campylobacter spp. og vil gøre det muligt antallet af Campylobacter bakterier, der producerer symptomer på gastroenteritis hos mennesker, der skal bestemmes, og for prævalens satser, der skal opdateres.

Tags

Immunologi og infektion

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved