JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Immunology and Infection

Cultuurmethoden om de limiet van detectie en overleving in transportmedia van Campylobacter Jejuni in menselijke fecale specimens te bepalen

Published: March 10th, 2020

DOI:

10.3791/60457

1TECHLAB, Inc.

Een cultuur van menselijke ontlasting voor de diagnose van Campylobacter-gebaseerdedarmziekte duurt enkele dagen, een wachttijd dat de standvastigheid van de arts en de patiënt belastingen. Een cultuur is ook gevoelig voor valse negatieve resultaten van willekeurig verlies van levensvatbaarheid tijdens het hanteren van specimens, overgroei van andere fecale flora, en slechte groei van verschillende pathogene Campylobacter soorten op traditionele media. Deze problemen kunnen klinische beslissingen over de behandeling van patiënten verwarren en hebben het veld beperkt van het beantwoorden van fundamentele vragen over de groei van Campylobacter en infecties. We beschrijven een procedure die de ondergrens van bacteriële getallen schat die kunnen worden gedetecteerd door een cultuur en een methode voor het kwantificeren van de overleving van C. jejuni in media die worden gebruikt voor het vervoer van dit fragiele organisme. Het kennen van deze informatie, wordt het mogelijk om klinisch relevante detectiedrempels in te stellen voor diagnostische tests en onbestudeerde kwesties aan te pakken van de vraag of niet-symptomatische kolonisatie voorkomt, als co-infectie met andere enterische pathogenen vaak voorkomt, of als bacteriële belasting correleert met symptomen of ernstige sequelae. De studie omvatte ook het testen van 1.552 prospectief verzamelde patiënt diarree fecale exemplaren die aanvankelijk werden geclassificeerd door conventionele cultuur en verder getest door een nieuw enzym immunoassay. Positieve en discrepant specimens werden vervolgens gescreend door vier moleculaire methoden om true-positieve of true-negatieve status toe te wijzen. De 5 niet-cultuurmethoden toonden volledige overeenstemming over alle 48 positieve en discrepant specimens, terwijl de cultuur verkeerd geïdentificeerd 14 (28%). De monsters die ten onrechte werden geïdentificeerd door de cultuur opgenomen 13 valse negatieve en 1 vals-positieve monster. Dit basisprotocol kan worden gebruikt met meerdere Campylobacter spp. en zal het mogelijk maken het aantal Campylobacter bacteriën die symptomen van gastro-enteritis produceren bij de mens te bepalen en voor prevalentie tarieven worden bijgewerkt.

Tags

Immunologie en infectie

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved