Abstract
Immunology and Infection
En kultur fra menneskelig avføring for diagnose av Campylobacter-baserttarmsykdom tar flere dager, en ventetid som skatter styrke av legen og pasienten. En kultur er også utsatt for falske negative resultater fra tilfeldig tap av levedyktighet under prøvehåndtering, overvekst av annen fekal flora og dårlig vekst av flere patogene Campylobacter arter på tradisjonelle medier. Disse problemene kan forvirre kliniske beslutninger om pasientbehandling og har begrenset feltet fra å svare på grunnleggende spørsmål om Campylobacter vekst og infeksjoner. Vi beskriver en prosedyre som estimerer den nedre grensen for bakterietall som kan oppdages av en kultur og en metode for å kvantifisere overlevelse av C. jejuni i media som brukes til transport av denne skjøre organismen. Å vite denne informasjonen, blir det mulig å sette klinisk relevante deteksjonsterskler for diagnostiske tester og løse ustuderte problemer med om ikke-symptomatisk kolonisering er utbredt, hvis samtidig infeksjon med andre enteriske patogener er vanlig, eller hvis bakteriell belastning korrelerer med symptomer eller alvorlig sekvele. Studien inkluderte også testing av 1552 prospektivt innsamlede pasientdiaréfekale prøver som i utgangspunktet ble klassifisert av konvensjonell kultur og videre testet av en ny enzymimmunoassay. Positive og discrepant prøver ble deretter screenet av fire molekylære metoder for å tildele sann-positiv eller sann-negativ status. De 5 ikke-kulturmetodene viste fullstendig enighet om alle 48 positive og diskrepantprøver, mens kulturen feilidentifiserte 14 (28%). Prøvene som ble feilaktig identifisert av kultur inkluderte 13 falske negative og 1 falsk positiv prøve. Denne grunnleggende protokollen kan brukes med flere Campylobacter spp. og vil tillate antall Campylobacter bakterier som produserer symptomer på gastroenteritt hos mennesker for å bli bestemt og for utbredelse srater som skal oppdateres.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved