Métodos de Cultura para determinar o limite de detecção e sobrevivência em mídia de transporte de Campylobacter Jejuni em espécimes fecais humanos

Uma cultura de fezes humanas para o diagnóstico de doença intestinal baseada em Campylobacterleva vários dias, uma espera que tributa a fortaleza do médico e do paciente. Uma cultura também é propensa a resultados falsos negativos da perda aleatória de viabilidade durante o manuseio de amostras, crescimento excessivo de outras flora fecal, e baixo crescimento de várias espécies patogênicas de Campylobacter na mídia tradicional. Esses problemas podem confundir decisões clínicas sobre o tratamento do paciente e limitar ambulatos de responder a questões fundamentais sobre o crescimento e infecções de Campylobacter. Descrevemos um procedimento que estima o limite inferior de números bacterianos que podem ser detectados por uma cultura e um método para quantificar a sobrevivência de C. jejuni em mídia utilizada para o transporte deste organismo frágil. Conhecendo essas informações, torna-se possível estabelecer limiares de detecção clinicamente relevantes para testes diagnósticos e abordar questões não estudadas sobre se a colonização não sintomática é prevalente, se a coinfecção com outros patógenos entéricos é comum ou se a carga bacteriana se correlaciona com sintomas ou sequelas graves. O estudo também incluiu testes de 1.552 amostras diarelanas diarelais prospectivas que foram inicialmente classificadas pela cultura convencional e posteriormente testadas por um novo imunoensaio enzimático. Amostras positivas e discrepantes foram então examinadas por quatro métodos moleculares para atribuir status verdadeiro-positivo ou verdadeiro-negativo. Os 5 métodos não culturais mostraram total concordância em todos os 48 espécimes positivos e discrepantes, enquanto a cultura identificou mal 14 (28%). Os espécimes que foram incorretamente identificados pela cultura incluíram 13 amostras falsas negativas e 1 falsa amostra positiva. Este protocolo básico pode ser usado com vários Campylobacter spp. e permitirá que os números de bactérias Campylobacter que produzem sintomas de gastroenterite em humanos sejam determinados e que as taxas de prevalência sejam atualizadas.