JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Immunology and Infection

Kulturmetoder för att bestämma gränsen för upptäckt och överlevnad i Transport Media of Campylobacter Jejuni i humana fekalprover

Published: March 10th, 2020

DOI:

10.3791/60457

1TECHLAB, Inc.

En kultur från mänsklig avföring för diagnos av Campylobacter-baseradtarmsjukdom tar flera dagar, en väntan som beskattar läkarens och patientens mod. En kultur är också benägna att falska negativa resultat från slumpmässig förlust av lönsamhet under provhantering, överväxt av andra fekal flora, och dålig tillväxt av flera patogena Campylobacter arter på traditionella medier. Dessa problem kan förvirra kliniska beslut om patientbehandling och har begränsat området från att svara på grundläggande frågor om Campylobacter tillväxt och infektioner. Vi beskriver ett förfarande som uppskattar den nedre gränsen för bakterienummer som kan detekteras med en kultur och en metod för att kvantifiera överlevnad c. jejuni i media som används för transport av denna bräckliga organism. Att känna till denna information, blir det möjligt att fastställa kliniskt relevanta detektionströsklar för diagnostiska tester och ta itu med ostuderade frågor om huruvida icke-symptomatisk kolonisering är utbredd, om samtidig infektion med andra enteric patogener är vanligt, eller om bakteriell belastning korrelerar med symtom eller allvarliga och sviter. Studien inkluderade också testning av 1.552 prospektivt insamlade patienten diarré fekal prover som ursprungligen klassificerades av konventionell kultur och ytterligare testas av ett nytt enzym immunoassay. Positiva och diskreta exemplar kontrollerades sedan av fyra molekylära metoder för att tilldela sann positiv eller sann negativ status. De fem icke-kulturmetoderna visade fullständig enighet om alla 48 positiva och åtskilda exemplar, medan kulturen felidentifierade 14 (28 %). De exemplar som felaktigt identifierades av kultur ingår 13 falska negativa och 1 falskt positivt prov. Detta grundläggande protokoll kan användas med flera Campylobacter spp. och kommer att tillåta antalet Campylobacter bakterier som producerar symtom på gastroenterit hos människor som skall fastställas och för prevalensen som skall uppdateras.

Tags

Immunologi och infektion

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved