Dynamisk mätning och avbildning av kapillärer, arterioler och pericyter i mushjärtat

Kranskärlens artärton tillsammans med öppnandet eller stängningen av kapillärerna bestämmer till stor del blodflödet till kardiomyocyter vid konstant perfusionstryck. Det är dock svårt att övervaka de dynamiska förändringarna i kranskärlen och kapillärerna i hela hjärtat, främst på grund av dess rörelse och non-stop slå. Här beskriver vi en metod som möjliggör övervakning av kranskärlens perfusionshastighet, tryck och diameter förändringar av artärer och kapillärer i mus rätt Ventrikulärt papillary muskler. Musens septala artär är kannulerad och perfused vid ett konstant flöde eller tryck med den andra dynamiskt uppmätta. Efter perfusion med en fluorescerande märkt lectin (t.ex. Alexa Fluor-488 eller -633 märkt Wheat-Germ Agglutinin, WGA), arterioler och kapillärer (och andra kärl) i rätt ventrikel papillary muskel och septum kunde lätt avbildas. Förändringar i kärldiametern kan sedan mätas i närvaro eller frånvaro av hjärtkontraktioner. När genetiskt kodade fluorescerande proteiner uttrycktes kunde specifika egenskaper övervakas. Till exempel visualiserades pericyter i mushjärtan som uttryckte NG2-DsRed. Denna metod har gett en användbar plattform för att studera de fysiologiska funktionerna hos kapillärpericyter i hjärtat. Det är också lämpligt för att studera effekten av reagenser på blodflödet i hjärtat genom att mäta kärl/kapillärdiametern och det arteriella luminaltrycket samtidigt. Denna förberedelse, i kombination med ett toppmodernt optiskt bildsystem, gör det möjligt att studera blodflödet och dess kontroll på cellulär och molekylär nivå i hjärtat under nästan fysiologiska förhållanden.