下游免疫污染分析小鼠水母上皮周期特定阶段的转化-辅助解剖

精子生成是一个独特的分化过程，最终产生身体最独特的细胞类型之一，精子。生殖细胞的分化发生在体细胞的细胞质口袋中，这些细胞同时承载4至5代生殖细胞，并协调和同步其发育。因此，横截面内生殖细胞类型的组成是恒定的，这些细胞关联也被称为半上皮周期的阶段（I-XII）。重要的是，阶段也可以根据透水所揭示的微分光吸收/散射特性，以及这些阶段沿管子以数字顺序相互跟随的事实，从完整的半细管中识别出来。本文描述了一种透水辅助微分流方法，用于分离代表小鼠半尖上皮周期特定阶段的半细管段。先在解剖显微镜下检查半成品管的光吸收模式，然后切割代表特定阶段的管状段，用于下游应用。在这里，我们描述了针对特定阶段的壁球制剂和完整的大块头段的免疫污染协议。这种方法使研究人员能够专注于精子生成特定阶段发生的生物事件，从而为精子生成和基础分子机制的发育、毒理学和细胞学研究提供了独特的工具。