Abstract
Developmental Biology
शुक्राणुएटोजेनेसिस एक अनूठी भेदभाव प्रक्रिया है जो अंततः शरीर के सबसे अलग कोशिका प्रकारों में से एक शुक्राणु को जन्म देती है। रोगाणु कोशिकाओं का भेदभाव दैहिक सेर्टोली कोशिकाओं के साइटोप्लाज्मिक जेब में होता है जो एक साथ 4 से 5 पीढ़ियों की रोगाणु कोशिकाओं की मेजबानी करता है और उनके विकास को समन्वित और सिंक्रोनाइज करता है। इसलिए, एक क्रॉस-सेक्शन के भीतर रोगाणु कोशिका प्रकारों की संरचना स्थिर है, और इन सेल संघों को अर्धनिफेरस एपिथेलियल चक्र के चरणों (I-XII) के रूप में भी जाना जाता है। महत्वपूर्ण बात, चरणों को उनके अंतर प्रकाश अवशोषण/बिखराव विशेषताओं के आधार पर अक्षुण्ण अर्धनिषदीय ट्यूबलों से भी पहचाना जा सकता है, और यह तथ्य कि चरण संख्यात्मक क्रम में ट्यूबुल के साथ एक दूसरे का अनुसरण करते हैं । यह लेख माउस अर्धनिफेरस एपिथेलियल चक्र के विशिष्ट चरणों का प्रतिनिधित्व करने वाले अर्धनिफेरस ट्यूबल सेगमेंट के अलगाव के लिए ट्रांसिल्यूमिनेशन-असिस्टेड माइक्रोडिसेक्शन विधि का वर्णन करता है। सेमिनिफेरस ट्यूबल के प्रकाश अवशोषण पैटर्न का पहले विच्छेदन माइक्रोस्कोप के तहत निरीक्षण किया जाता है, और फिर विशिष्ट चरणों का प्रतिनिधित्व करने वाले ट्यूबल सेगमेंट को काट दिया जाता है और डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगों के लिए उपयोग किया जाता है। यहां हम स्टेज-स्पेसिफिक स्क्वैश तैयारियों के लिए और अक्षुण्ण ट्यूबल सेगमेंट के लिए इम्यूनोस्टेपिंग प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं। यह विधि एक शोधकर्ता को शुक्राणुओं के विशिष्ट चरणों में होने वाली जैविक घटनाओं पर ध्यान केंद्रित करने की अनुमति देती है, इस प्रकार शुक्राणुओं और अंतर्निहित आणविक तंत्र के विकासात्मक, विषविज्ञानी और साइटोलॉजिकल अध्ययन के लिए एक अद्वितीय उपकरण प्रदान करती है।
Tags
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved