Трансиллюминация-помощь рассечение конкретных этапов мыши seminiferous эпителиального цикла для downstream иммуностенсивных анализов

Сперматогенез является уникальным процессом дифференциации, что в конечном итоге приводит к одному из самых различных типов клеток тела, спермы. Дифференциация зародышевых клеток происходит в цитоплазмических карманах соматических клеток Сертоли, которые одновременно принимают от 4 до 5 поколений зародышевых клеток и координируют и синхронизируют их развитие. Таким образом, состав типов зародышевых клеток в поперечном сечении является постоянным, и эти клеточные ассоциации также известны как этапы (I-XII) семенного эпителиального цикла. Важно отметить, что этапы могут быть также определены из нетронутых семенных трубок на основе их дифференциального поглощения света / рассеяния характеристики, выявленные трансилюминации, и тот факт, что этапы следуют друг за другом вдоль трубочки в численном порядке. В этой статье описывается метод микродиссекции с помощью трансиллюминации для изоляции семенных сегментов труб, представляющих конкретные этапы семенного эпителиального цикла мыши. Схема поглощения света семенных трубочки сначала проверяется под микроскопом вскрытия, а затем сегменты труб, представляющие конкретные этапы, вырезаются и используются для нисходящего применения. Здесь мы описываем иммуностимулирование протоколов для стадии конкретных препаратов сквош и для нетронутых сегментов труб. Этот метод позволяет исследователю сосредоточиться на биологических событиях, происходящих на определенных этапах сперматогенеза, обеспечивая тем самым уникальный инструмент для развития, токсикологических и цитологических исследований сперматогенеза и лежащих в основе молекулярных механизмов.