Abstract
Bioengineering
Lipidbaserade läkemedelsbärare har använts för kliniskt och kommersiellt tillgängliga leveranssystem på grund av deras lilla storlek, biokompatibilitet och höga inkapslingseffektivitet. Användning av lipidnanopartiklar (LNPs) för att kapsla in nukleinsyror är fördelaktigt för att skydda RNA eller DNA från nedbrytning, samtidigt som cellulärt upptag främjas. LNPs innehåller ofta flera lipidkomponenter inklusive en joniserbar lipid, hjälpare lipid, kolesterol och polyetylenglykol (PEG) konjugerad lipid. LNPs kan lätt kapsla in nukleinsyror på grund av den joniserbara lipidförekomsten, som vid lågt pH-upphetsningsmedel och möjliggör hy med negativt laddat RNA eller DNA. Här bildas LNPs genom att kapsla in budbärar-RNA (mRNA) eller plasmid-DNA (pDNA) med snabb blandning av lipidkomponenterna i en organisk fas och nukleinsyrakomponenten i en vattenfas. Denna blandning utförs med hjälp av en exakt mikrofluidisk blandningsplattform, vilket möjliggör självmontering av nanopartiklar samtidigt som laminärt flöde bibehålls. Den hydrodynamiska storleken och polydispersiteten mäts med hjälp av dynamisk ljusspridning (DLS). Den effektiva ytladdningen på LNP bestäms genom att mäta zetapotentialen. Inkapslingseffektiviteten kännetecknas av ett fluorescerande färgämne för att kvantifiera inspädd nukleinsyra. Representativa resultat visar reproducerbarheten av denna metod och det inflytande som olika formulerings- och processparametrar har på de utvecklade LNP: erna.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved