用于表征用于超声触发药物释放的荧光标记微气泡的多时间尺度显微镜方法

微气泡造影剂在超声药物输送应用中具有很大的前景。将药物封装在纳米颗粒中可降低全身毒性并增加药物的循环时间。在微气泡辅助药物递送的新方法中，纳米颗粒被掺入微气泡壳中或微气泡壳上，从而能够通过超声波局部和触发释放纳米颗粒有效载荷。全面了解广阔超声参数空间内的释放机制对于高效和受控释放至关重要。这组提出的方案适用于具有含有荧光标记的外壳的微气泡。在这里，重点是装载聚（2-乙基丁基氰基丙烯酸酯）聚合物纳米颗粒的微气泡，掺杂了改性的尼罗河红染料。颗粒固定在变性的酪蛋白壳内。微气泡通过剧烈搅拌产生，在含有酪蛋白和纳米颗粒的液相中形成全氟丙烷气体的分散体，之后微气泡壳自组装。需要各种显微镜技术来表征纳米颗粒稳定微气泡在纳米颗粒释放过程的所有相关时间尺度上。纳米颗粒的荧光可以对单个微气泡进行共聚焦成像，揭示壳内的颗粒分布。使用明场显微镜以每秒1000万帧的速度进行 体外 超高速成像，可以深入了解响应超声共振的气泡动力学。最后，从气泡壳中释放的纳米颗粒最好通过荧光显微镜进行可视化，以每秒500，000帧的速度进行。为了表征 体内药物递送，在植入背侧皮褶窗室的肿瘤中使用活体显微镜研究脉管系统内纳米颗粒的触发释放及其在内皮层之外的外渗，时间范围为几分钟。这些互补表征技术的结合为微气泡的行为及其有效载荷在 体外 和 体内的时间和长度尺度上的释放提供了独特的见解。