이 작품은 이스라엘 과학 재단 (ISF 보조금 # 902/18)에 의해 지원되었다. 마리아 Khoury의 장학금은 바론스 아리안 드 로스차일드 여성 박사 프로그램에 의해 지원되었다.

참고: 이 프로토콜은 경동맥의 3D 모델의 제조를 설명하고 기하학적 매개 변수를 수정하기만 하면 관심 있는 다른 동맥을 생성하기 위해 적용할 수 있습니다.
1. 인간 경동맥 모델의 3D 분기의 설계 및 제조
<ol><li>환자 또는 이전에 연구된 인간 경동맥 분기의 형상에서 이미지를 선택하고 인쇄해야 하는 금형의 컴퓨터 지원 설계 모델을 만듭니다. 참고: 경동맥 분비화에는 하...

<ol>
	<li>Chiu, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+the+effect+of+disturbed+flow+on+monocytic+adhesion+to+endothelial+cells.">Analysis of the effect of disturbed flow on monocytic adhesion to endothelial cells.</a> Journal of Biomechanics. 36 (12), 1883-1895 (2003).</li><li>Martorell, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extent+of+flow+recirculation+governs+expression+of+atherosclerotic+and+thrombotic+biomarkers+in+arterial+bifurcations.">Extent of flow recirculation governs expression of atherosclerotic and thrombotic biomarkers in arterial bifurcations.</a> Cardiovascular Research. 103 (1), 37-46 (2014).</li><li>Karino, T., Goldsmith, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+behaviour+of+blood+cells+and+rigid+spheres+in+an+annular+vortex.">Flow behaviour of blood cells and rigid spheres in an annular vortex.</a> Philosophical transactions of the Royal Society of London. Series B, Biological. 279 (967), 413-445 (1977).</li><li>Goldsmith, H. L., Karino, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelets+in+a+region+of+disturbed+flow.">Platelets in a region of disturbed flow.</a> Transactions - American Society for Artificial Internal Organs. 23, 632-638 (1977).</li><li>Farcas, M. A., Rouleau, L., Fraser, R., Leask, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+of+3-D,+in+vitro,+endothelial+culture+models+for+the+study+of+coronary+artery+disease.">The development of 3-D, in vitro, endothelial culture models for the study of coronary artery disease.</a> Biomedical Engineering Online. 8, 30 (2009).</li><li>Peng, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+nanoparticle+targeting+to+a+vascular+surface+in+shear+flow+through+diffusive+particle+dynamics.">Modeling nanoparticle targeting to a vascular surface in shear flow through diffusive particle dynamics.</a> Nanoscale Research Letters. 10 (1), 942 (2015).</li><li>Shah, S., Liu, Y., Hu, W., Gao, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+particle+shape-dependent+dynamics+in+nanomedicine.">Modeling particle shape-dependent dynamics in nanomedicine.</a> Journal of Nanoscience and Nanotechnology. 11 (2), 919-928 (2011).</li><li>Hossain, S. S., Hughes, T. J., Decuzzi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+deposition+patterns+for+nanoparticles+in+an+inflamed+patient-specific+arterial+tree.">Vascular deposition patterns for nanoparticles in an inflamed patient-specific arterial tree.</a> Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. 13 (3), 585-597 (2014).</li><li>Charoenphol, P., Huang, R. B., Eniola-Adefeso, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+role+of+size+and+hemodynamics+in+the+efficacy+of+vascular-targeted+spherical+drug+carriers.">Potential role of size and hemodynamics in the efficacy of vascular-targeted spherical drug carriers.</a> Biomaterials. 31 (6), 1392-1402 (2010).</li><li>Ta, H. T., Truong, N. P., Whittaker, A. K., Davis, T. P., Peter, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+particle+size,+shape,+density+and+flow+characteristics+on+particle+margination+to+vascular+walls+in+cardiovascular+diseases.">The effects of particle size, shape, density and flow characteristics on particle margination to vascular walls in cardiovascular diseases.</a> Expert Opinion on Drug Delivery. 15 (1), 33-45 (2018).</li><li>Cooley, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+particle+size+and+shape+on+their+margination+and+wall-adhesion:+implications+in+drug+delivery+vehicle+design+across+nano-to-micro+scale.">Influence of particle size and shape on their margination and wall-adhesion: implications in drug delivery vehicle design across nano-to-micro scale.</a> Nanoscale. 10 (32), 15350-15364 (2018).</li><li>Jiang, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantum+dot+interactions+and+flow+effects+in+angiogenic+zebrafish+(Danio+rerio)+vessels+and+human+endothelial+cells.">Quantum dot interactions and flow effects in angiogenic zebrafish (Danio rerio) vessels and human endothelial cells.</a> Nanomedicine: Nanotechnology, Biology, and Medicine. 13 (3), 999-1010 (2017).</li><li>Zarins, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carotid+bifurcation+atherosclerosis.+Quantitative+correlation+of+plaque+localization+with+flow+velocity+profiles+and+wall+shear+stress.">Carotid bifurcation atherosclerosis. Quantitative correlation of plaque localization with flow velocity profiles and wall shear stress.</a> Circulation Research. 53 (4), 502-514 (1983).</li><li>Chien, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+disturbed+flow+on+endothelial+cells.">Effects of disturbed flow on endothelial cells.</a> Annals of Biomedical Engineering. 36 (4), 554-562 (2008).</li><li>Malek, A. M., Alper, S. L., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamic+shear+stress+and+its+role+in+atherosclerosis.">Hemodynamic shear stress and its role in atherosclerosis.</a> JAMA. 282 (21), 2035-2042 (1999).</li><li>Glagov, S., Zarins, C., Giddens, D. P., Ku, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamics+and+atherosclerosis.+Insights+and+perspectives+gained+from+studies+of+human+arteries.">Hemodynamics and atherosclerosis. Insights and perspectives gained from studies of human arteries.</a> Archives of Pathology &amp; Laboratory Medicine. 112 (10), 1018-1031 (1988).</li><li>Khoury, M., Epshtein, M., Zidan, H., Zukerman, H., Korin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+deposition+of+particles+in+reconstructed+models+of+human+arteries.">Mapping deposition of particles in reconstructed models of human arteries.</a> Journal of Controlled Release. 318, 78-85 (2020).</li></ol>

입자의 혈관 표적을 연구하는 현재접근은 인체에 존재하는 생리적 조건을 복제하는 데 부족합니다. 여기에 제시된 인간 동맥의 3D 재구성 모델을 조작하여 맞춤형 관류 시스템을 사용하여 적용되는 생리적 흐름하에서 동맥을 감싸는 IC에 입자 타겟팅을 연구하는 프로토콜이 여기에 제시된다. 3D 프린팅용 재료를 선택할 때는 투명 플라스틱 모델로의 안료 전달을 피하기 위해 투명 플라스틱을 사용...

최근 인간 동맥1,2,3,4,5의3D 모델을 활용하여 여러 가지 접근 법이 적용되었습니다. 이러한 모델은 생체 내인체에 있는 다른 동맥의 생리해부학 및 환경을 복제합니다. 그러나, 그(것)들은 주로 세포 생물학 연구 결과에서 이용되었습니다. 내피성으로 입자의 혈관 표적화에 대한 현재 연구는 실리코 전산 시뮬레이션6,7,8, 체외 미세 유체 모델9,10,11및 생체 내 동물모델(12)에포함된다. 그들이 제공 한 통찰력에도 불구하고, 이러한 실험 모델은 정확하게 혈액 흐름과 혈역학이 지배적 인 요인을 구성하는 인간의 동맥에서 발생하는 타겟팅 프로세스를 시뮬레이션하는 데 실패했습니다. 예를 들어, 복잡한 재순환 흐름 패턴 및 벽 전단 응력 그라데이션으로 알려진 경동맥 분열에서 죽상 경화성 영역을 표적으로 하는 입자의 연구는내피(13),14,15,16에도달하기 전에 입자가 취한 여행에 영향을 미칠 수 있다. 따라서 이러한 연구는 생리적 환경, 즉크기, 치수, 해부학 및 유동 프로필을 복제하는 조건하에서 수행해야 합니다.
최근에, 이 연구 그룹은 3D 재구성된 인간 동맥 모델을 제조하여혈관(17)에입자의 증착 및 표적을 연구하였다. 모델은 인간 혈관의 기하학적 3D 복제본을 기반으로 했으며, 그 후 내부 벽을 줄지어 있는 인간 적인 IC로 배양되었습니다. 또한 생리적 흐름을 생성하는 관류 시스템을 실시하면 모델은 생리적 상태를 정확하게 복제했습니다. 관류 시스템은 폐쇄 및 개방 회로 구성 모두에서 연동 펌프를 사용하여 일정한 유량으로 유체를 퍼퓨즈하도록설계되었습니다(그림 1). 이 시스템은 경동맥 모델 내부에 시드된 셀에 파티클 증착 및 타겟팅을 매핑하는 폐쇄 회로로 사용할 수 있습니다. 또한, 실험의 끝에서 비부착 입자를 세척하고 시스템을 청소하고 유지하기 위해 개방 회로로 사용될 수 있다. 이 백서는 인간 경동맥 분기의 3D 모델 제조, 관류 시스템의 설계 및 모델 내부의 표적 입자의 증착 매핑을 위한 프로토콜을 제시합니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3D printer</td>
			<td>FormLabs</td>
			<td>PKG-F2-REFURB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone, absolute (AR grade)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Connectors</td>
			<td>Nordson Medical</td>
			<td>FTLL013-1</td>
			<td>Female Luer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>FTLL230-1</td>
			<td>Female Luer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>FTLL360-1</td>
			<td>Female Luer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>LP4-1</td>
			<td>Male Luer Integral Lock</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Damper</td>
			<td>Thermo-Fisher Scientific</td>
			<td>DS2127-0250</td>
			<td>Nalgene Polycarbonate, Validation Bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Damper Cover</td>
			<td>Thermo-Fisher Scientific</td>
			<td>2162-0531</td>
			<td>Nalgene Filling/Venting Closures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elastosil Elastosil RT 601 A</td>
			<td>Wacker</td>
			<td>60003805</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elastosil RT 601 B</td>
			<td>Wacker</td>
			<td>60003817</td>
			<td>The crosslinker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endothelial Cell Media</td>
			<td>ScienCell</td>
			<td>1001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrontectin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F0895-5mg</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HUVEC</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>CC-2519</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropyl alcohol, AR grade 99.5%</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Remove plastic dust from the sanded model</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lacquer</td>
			<td>Rust-Oleum</td>
			<td></td>
			<td>2X-Ultra cover Gloss Clear</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matlab</td>
			<td>Mathworks</td>
			<td></td>
			<td>https://www.mathworks.com/products/matlab.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope Camera</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>DS-Qi2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peristaltic pump</td>
			<td>Watson Marlow</td>
			<td>530U IP31</td>
			<td>With 2 pumpheads: 313D</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic tube clamp</td>
			<td>Quickun</td>
			<td>1-2240-stopvalve-2pcs</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polystyrene Particles</td>
			<td>&#160;Thermo-Fisher Scientific</td>
			<td>&#160;F8827</td>
			<td>&#160;Diameter = 2 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Printer resin</td>
			<td>FormLabs</td>
			<td>RS-F2-GPCL-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotator</td>
			<td>ELMI Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Intelli-Mixer RM-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solidworks&#160;</td>
			<td>SolidWorks Corp.,&#160;Dassault Syst&#232;mes</td>
			<td></td>
			<td>https://www.solidworks.com/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tubing</td>
			<td>Watson Marlow</td>
			<td>933.0064.016</td>
			<td>Tubing for the pump: 6.4 mm ID</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>All the other tubing: Silicon tubing: 4 mm ID</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro 3d cell-cultured arterial models for studying vascular drug targeting under flow

올바른 치수와 해부학으로 설계된 인간 동맥의 3차원 (3D) 모델을 사용하면 심혈관 시스템에서 다양한 중요한 과정을 적절하게 모델링 할 수 있습니다. 최근, 여러 생물학적 연구가 인간 동맥의 이러한 3D 모델을 사용하여 수행되었지만 혈관 표적을 연구하기 위해 적용되지 않았습니다. 이 논문은 3D 프린팅 기술을 사용하여 실제 크기의 재구성된 인간 동맥 모델을 제조하고, 인간 내피 세포(EC)와 정렬하고, 생리적 흐름하에서 입자 타겟팅을 연구하는 새로운 방법을 제시합니다. 이러한 모델은 저비용 성분을 사용하여 인체에서 혈관의 생리적 크기와 상태를 복제하는 장점이 있습니다. 이 기술은 연구 하 고 심장 혈관 시스템에서 약물 타겟팅을 이해 하기 위한 새로운 플랫폼 역할을 할 수 있습니다 및 새로운 주 사용 나노 의약품의 디자인을 향상 시킬 수 있습니다. 더욱이, 제시된 접근은 환자 특정 흐름 및 생리적 조건하에서 심혈관 질병을 위한 다른 에이전트의 표적 납품의 연구 결과에 중요한 공구를 제공할 수 있습니다.

이 논문은 실제 크기의 3D 인간 동맥 모델 내부의 입자증착을 매핑하는 새로운 프로토콜을 제시하며, 이는 약물 전달 연구를 위한 새로운 플랫폼을 제공할 수 있습니다. 3D 프린팅 기술을 사용하여 인간 경동맥 양면 동맥의 모델을 제조하였다(도2). 모델은 실리콘 고무로 만들어졌으며 인간 적인 EC(그림 3)로시드되었습니다. 중요한 것은, 이 프로토콜은 ?...

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In Vitro 3D Cell-Cultured Arterial Models for Studying Vascular Drug Targeting Under Flow

여기서, 우리는 생리적 흐름하에서 제조된 실제 크기의 3차원 인간 동맥 모델에서 내피 세포에 약물 운반대의 표적 증착을 연구하고 매핑하는 새로운 프로토콜을 제시한다. 제시된 방법은 혈관 시스템 내의 약운반체를 표적으로 하는 새로운 플랫폼역할을 할 수 있다.

유동 하에서 혈관 약물 표적화 연구를 위한 체외 3D 세포 배양 동맥 모델

The use of three-dimensional (3D) models of human arteries, which are designed with the correct dimensions and anatomy, enables the proper modeling of ...

본 의정서는 인체 혈관 시스템 내의 질병 부위를 표적으로 하는 약물 운반선의 연구 및 개발을 위한 새로운 플랫폼역할을 할 수 있다. 우리의 기술의 주요 장점은 인간이 복제 한 3d 동맥 모델 내부에 약물 운반대의 축적을 연구 할 수 있다는 것입니다. 이것은 생리적인 조건 하에서 행해지며, 혈류를 포함하입니다.이 접근법은 죽상 경화성 동맥을 포함하여 광범위한 혈관 질환의 진단 및 치료를 위한 약물 운반대를 최적화하는 데 사용할 수 있습니다. 환자또는 이전에 연구된 인간 경동맥 의 형상을 선택하고 이미지를 사용하여 금형의 컴퓨터 지원 설계 모델을 만드는 것으로 시작합니다. 3D 프린터를 사용하여 설계를 인쇄하고, 임시 인쇄 지지대를 제거하고, 사포를 사용하여 금형, 특히 지지대가 절단된 영역을 연마하고 매끄럽게 하기 전에 아세톤으로 모델을 헹구십시오.샌드링 후 이소프로필 알코올로 모델을 헹구어 플라스틱 먼지를 제거하고 모델이 화학 후드에서 2~3시간 동안 건조할 수 있도록 합니다. 플라스틱의 환멸을 용이하게하기 위해 투명 옻칠로 모델을 세 번 스프레이하여 옻칠이 응용 프로그램 간에 1 시간 동안 공기 건조할 수 있도록합니다. 마지막 적용 후 페인트 브러시와 래커를 사용하여 프레임의 각 측면에 투명하고 직사각형 플라스틱 스트립을 붙이면 모델이 맨 아래에 밀봉되어 맨 위에 열립니다.건조 후, 건조기에 금형을 배치하고 천천히 가난한 갓 준비 실리콘 고무 용액을 개구부에 넣습니다. 혼합물이 명확해질 때까지 기포를 제거하고 밤새 건조기 내부에 금형을 둡니다. 혼합물이 완전히 건조되면 투명 슬라이드를 제거하고 플라스틱이 완전히 용해 될 때까지 화학 후드에 48 시간 동안 절대 아세톤에 모델을 담그십시오.세포 파종 전에 갇힌 아세톤을 증발시키기 위해 모델을 섭씨 60도에서 최소 4일 동안 배양합니다. 세포를 사용하여 모델을 시드하려면 먼저 자외선 또는 방사선에 의해 모델과 2개의 입구 및 콘센트 커넥터를 살균합니다. 20 분 후, 주사기를 사용하여 37섭씨에서 2 시간 동안 밀리리터 섬유 네틴 당 100 마이크로 그램의 4 밀리리터로 모델을 코팅합니다.인큐베이션의 끝에서, 출구를 통해 섬유네틴 용액을 제거하고 내피 세포 배지로 모델을 세척한다. 주사기를 사용하여 내피 세포 중간 세포 현탁액의 밀리리터 당 2.5 배 10 ~ 6 번째 내피 세포의 4 밀리리터로 헹구는 모델을 채우고 세포 배양 인큐베이터 내부의 회전자에 모델을 고정하여 분당 1 회전에서 48 시간 동안 세포의 균질성 분포를 보장하십시오. 인큐베이션이 끝나면 10밀리리터 플라스틱 주사기를 사용하여 PBS로 모델을 세척합니다.4%의 파라포름알데히드의 4밀리리터로 15분 동안 세포를 고정한 다음, 모델을 4밀리리터의 신선한 PBS로 섭씨 4도에서 저장하기 전에 시연된 대로 PBS로 모델을 세 번 세척합니다. 실험을 시작하기 전에 콘센트 튜빙을 사용하여 연막 펌프에 연결된 진동 댐퍼를 배양 된 경동맥 모델의 입구에 연결하고 튜브 조각을 사용하여 두 개의 콘센트를 병합하십시오. 그런 다음 콘센트 튜브를 두 개의 콘센트 튜브로 분할하고 각 튜브에 플라스틱 클램프를 추가합니다.폐쇄 회로 구성을 설정하려면 300밀리리터의 PBS를 폐쇄 회로 용기에 추가하고 B와 C 클램프가 열리는 PBS 채워진 컨테이너 내부에 1개의 입구와 콘센트 튜브를 놓은 다음 다른 입구 튜브를 증류수로 채워진 1리터 세척 용기에 넣고 다른 콘센트 튜브를 빈 1리터 세척 용기에 넣고 D클램프가 있는 빈 1리터 폐기물에 넣습니다. 각각. 경동맥 모델을 스테레오 현미경 아래에 놓고 펌프를 분당 10회전의 시작 유량으로 설정하고 분당 5개의 회전증가가 4~5분마다 증가합니다. 유량이 분당 100회 회전에 도달하면 PBS밀리리터당 1.6마이크로그램의 형광 카박스형 폴리스티렌 입자를 폐쇄 회로 용기에 추가하고 10초마다 10초마다 관심 영역을 이미지화합니다.개방형 회로 구성을 설정하려면 A 및 D 클램프를 열고 B 및 C 클램프를 즉시 닫습니다. 대부분의 물이 세척 용기에서 분당 100 회전에서 폐기물 용기로 흘러 들어오게하십시오. 물이 완전히 전달되기 전에 펌프를 멈추고 입구 앞과 경동맥 모델의 출구 후에 튜브 클램프를 닫습니다.적절한 필터를 사용하여 관심 영역에서 모델의 이미지를 캡처하여 파티클의 증착 및 접착력을 셀에 표시합니다. 실험이 완료되면 사용자 지정된 소프트웨어 코드를 사용하여 관심 영역에서 캡처한 이미지를 분석하고 이미지 이름을 입력하고 예상 임계값을 설정합니다. 그런 다음 코드를 실행합니다.결과 이미지와 이미지의 계산된 파티클 수를 검사합니다. 본 대표적인 분석에서, 3d 경동맥 모델에서 시드된 배양된 내피 세포의 사진 현미경 사진은 밝은 분야 및 형광 공초점 현미경 이미징에 의해 관찰될 수 있다. 3d 모델로 시드된 형광 10 미크론 직경 유리 구슬은 재순환 패턴을 나타내며 모델 내의 생리적 상태를 성공적으로 모방하는 것을 암시한다.입자 증착의 화상 진찰은 벽 전단 응력이 높은 재순환 영역 외부에서 세포에 입자의 접착수준이 높은 것으로 나타났다. 이러한 프로토콜에 따라, 특정 결합 운동및 상이한 인간 동맥 모델 내의 세포의 핵심 배양을 가진 기능화된 입자는 모델을 개선하고 특정 제형을 연구하기 위해 탐구될 수 있다. 이 기술은 약 운반대의 혈관 표적을 공부하기 위한 새로운 플랫폼을 제공합니다.우리는 최근에 입자의 첨가도 다른 질병 혈관 영역을 대상으로 조정할 수있는 방법을 보여주기 위해 그것을 사용했다.