السيطرة على هندسة الخلية من خلال الأشعة تحت الحمراء الليزر بمساعدة Micropatterning

Micropatterning هو تقنية راسخة في مجتمع بيولوجيا الخلايا المستخدمة لدراسة الاتصالات بين مورفولوجيا ووظيفة المقصورات الخلوية مع التحايل على المضاعفات الناشئة عن الاختلافات الطبيعية من خلية إلى خلية. لتوحيد شكل الخلية، تقتصر الخلايا إما في قوالب ثلاثية الأبعاد أو يتم التحكم فيها للهندسة اللاصقة من خلال الجزر اللاصقة. ومع ذلك، تعتمد تقنيات التجهم المجهري التقليدية القائمة على التصوير الضوئي وحفر الأشعة فوق البنفسجية العميقة بشكل كبير على الغرف النظيفة أو المعدات المتخصصة. هنا نقدم تقنية micropatterning بمساعدة الليزر بالأشعة تحت الحمراء (microphotopatterning) المعدلة من دويل وآخرون التي يمكن إعدادها بشكل ملائم مع أنظمة التصوير المتاحة تجاريا. في هذا البروتوكول، نستخدم نظام تصوير نيكون A1R MP+ لتوليد أجهزة مجهرية بدقة ميكرون من خلال ليزر الأشعة تحت الحمراء (IR) الذي يهيج المناطق المحددة مسبقا على الأغطية المغلفة بالكحول متعدد الفينيل. نحن نستخدم سيناريو مخصص لتمكين تصنيع نمط الآلي مع كفاءة عالية ودقة في أنظمة غير مجهزة التركيز البؤري التلقائي الأجهزة. نظهر أن هذا الليزر الأشعة تحت الحمراء بمساعدة micropatterning (microphotopatterning) يؤدي البروتوكول في أنماط محددة التي تعلق الخلايا حصرا وتأخذ على الشكل المطلوب. وعلاوة على ذلك، يمكن أن يكون متوسط البيانات من عدد كبير من الخلايا بسبب توحيد شكل الخلية. يمكن استخدام الأنماط الناتجة عن هذا البروتوكول ، إلى جانب التصوير عالي الدقة والتحليل الكمي ، لشاشات الإنتاجية العالية نسبيا لتحديد اللاعبين الجزيئيين الذين يتوسطون في الصلة بين الشكل والوظيفة.