JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Bioengineering

ייצור של דיו ביו-חומרים אגרוז משובץ ננו-תאית לגבישית

Published: May 11th, 2021

DOI:

10.3791/62519

1Nanotechnology Research Center, National Research Council Canada, 2Department of Medical Microbiology and Immunology, University of Alberta

ביו-הדפסה תלת מימדית (תלת-ממדית) משתמשת ברכיבים מרוכבים מבוססי הידרוג'ל (או דיו ביו-חומרי) המופקדים בתבנית ויוצרת מצע שעליו מופקדים תאים. מכיוון שדיו ביו-חומרים רבים יכולים להיות ציטוקסיים פוטנציאליים לתאים ראשוניים, יש צורך לקבוע את תאימות ביולוגית של מרוכבים הידרוג'ל אלה לפני השימוש שלהם בתהליכים יקרים של הנדסת רקמות תלת-ממדיות. כמה שיטות תרבית תלת-ממדית, כולל הדפסה ביולוגית, דורשות שתאים יוטבעו במטריצה תלת-ממדית, מה שמקשה על חילוץ וניתוח התאים לשינויים בכדאיות ובביטוי סמן ביולוגי מבלי לגרום לנזק מכני. פרוטוקול זה מתאר כהוכחה של מושג, שיטה להערכת תאימות ביולוגית של ננו-תאי גבישי (CNC) מוטבע אגרוז מרוכבים, מפוברק לתוך מערכת תרבית 24-well, עם תאי פיטום נגזר מח עצם העכבר (BMMCs) באמצעות תרסיסים ציטומטריים זרימה עבור הכדאיות התא וביטוי סמן ביולוגי.

לאחר 18 שעות של חשיפה למטריקס CNC / אגרוז / D-מניטול, הכדאיות BMMC לא היה ללא כל כפי שנמדד על ידי חמיצות יוד פרופיליום (PI). עם זאת, BMMCs תרבית על CNC / agarose / D-מניטול מצע נראה להגדיל מעט את הביטוי שלהם של קולטן IgE זיקה גבוהה (FcεRI) ואת קולטן גורם תא גזע (ערכה; CD117), למרות שזה לא נראה תלוי בכמות CNC בביוינק מורכב. הכדאיות של BMMCs הוערכה גם בעקבות חשיפה לקורס זמן לפיגומים הידרוג'ל שהיו מפוברקים מדיו ביו-חומרים מסחרי המורכב מננו-תאי פרברילר (FNC) ונתרן אלגינט באמצעות ביו-הדפסה תלת-ממדית. במשך תקופה של 6-48 שעות, מצעים FNC / אלגינט לא השפיעו לרעה על הכדאיות של BMMCs כפי שנקבע על ידי cytometry זרימה ובדיקות microtiter (XTT ו לקטט דהידרוגנאז). פרוטוקול זה מתאר שיטה יעילה לסנן במהירות את התאימות הביוכימית של דיו ביו-חומרים מועמד עבור השירות שלהם כפיגומים תלת-ממדיים לזריעה לאחר ההדפסה עם תאי פין.

Explore More Videos

171

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved