Abstract
Immunology and Infection
1-シアノ-4-ジメチルアミノピリジンテトラフルオロ化物(CDAP)を用いた可溶性多糖の活性化と結合
ERRATUM NOTICE
Important: There has been an erratum issued for this article. Read more …共役ワクチンは、ワクチン接種の顕著な進歩である。多糖類共役ワクチンの調製のために、多糖類は便利に機能し、1-シアノ-4-ジメチルアミノピリジン四フルオロプロ酸(CDAP)を使用してワクチンキャリアタンパク質に結合することができ、容易に扱いやすいシアニル化試薬である。CDAPは、pH 7-9で炭水化物ヒドロキシル基と反応することにより、多糖類を活性化します。CDAPの安定性と反応性は、pHに依存します。反応のpHはまたCDAPの加水分解による活性化の間に減少し、再現性活性化への鍵を制御する良好なpHを作る。元のCDAP活性化プロトコルは、非バッファpH 9ソリューションで室温で実行されました。
この条件下での迅速な反応(<3分)とそれに伴う高速PH低下により、迅速にCDAP加水分解から、短時間で目標反応pHを迅速に調整し、維持することは困難でした。ここで説明する改良されたプロトコルは、CDAP加水分解を遅くし、活性化時間を3分から〜15分に延長する0°Cで行われます。ジメチルアミノピリジン(DMAP)は、CDAP試薬を添加する前に、標的活性化pHに多糖溶液を事前調整するバッファーとしても使用された。より長い反応時間は、遅いCDAP加水分解とDMAPバッファの使用と相まって、活性化プロセスの全期間の活性化pHを維持することが容易になります。強化されたプロトコルにより、アクティベーションプロセスは、より熱狂的で、再現性が高く、スケールアップに適しています。
Erratum
Erratum: Activation and Conjugation of Soluble Polysaccharides using 1-Cyano-4-Dimethylaminopyridine Tetrafluoroborate (CDAP)An erratum was issued for: Activation and Conjugation of Soluble Polysaccharides using 1-Cyano-4-Dimethylaminopyridine Tetrafluoroborate (CDAP). A figure was updated.
Figure 4 was updated from:
Figure 4: Representative results for CDAP activation of dextran. Typical standard curves for the (A) resorcinol/sulfuric acid and (B) TNBS assays. The assay results for dextran activated with 0.25 and 0.5 mg CDAP/mg dextran are shown. Glucose was used as the standard for the resorcinol assay. Dextran, in mg/mL, is divided by 100 kDa to give a molar concentration. The hydrazide concentration is determined using ADH as the standard and the results expressed as µM Hz. (C) Calculation of hydrazide: dextran ratios.The level of derivatization was calculated as hydrazides per 100 kDa of dextran to facilitate the comparison between polymers of different average molecular weights. The % weight ratio of g ADH/g dextran was calculated using a MW of 174 g/mole for ADH. Please click here to view a larger version of this figure.
to:
Figure 4: Representative results for CDAP activation of dextran. Typical standard curves for the (A) resorcinol/sulfuric acid and (B) TNBS assays. The assay results for dextran activated with 0.25 and 0.5 mg CDAP/mg dextran are shown. Glucose was used as the standard for the resorcinol assay. Dextran, in mg/mL, is divided by 100 kDa to give a molar concentration. The hydrazide concentration is determined using ADH as the standard and the results expressed as µM Hz. (C) Calculation of hydrazide: dextran ratios.The level of derivatization was calculated as hydrazides per 100 kDa of dextran to facilitate the comparison between polymers of different average molecular weights. The % weight ratio of g ADH/g dextran was calculated using a MW of 174 g/mole for ADH. Please click here to view a larger version of this figure.
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