잎 딱정벌레의 숙주 - 장 microbiota 상호 작용 연구를위한 조직 배양 묘목으로 축 곤충 준비 및 사육

도끼 곤충을 얻기 위해 달걀 표면을 살균하고 부화 한 유충은 도끼 잎을 사용하여 사육됩니다. 이 방법은 항생제를 투여하거나 다른 잎을 먹는 곤충에도 적용 할 수있는 인공 식단을 개발하지 않고도 축산 곤충 준비를위한 효율적인 방법을 제공합니다.

곤충 내장은 숙주의 생리적 특성에 심각한 영향을 줄 수있는 다양한 박테리아에 의해 식민지화됩니다. 특정 박테리아 균주를 축삭 곤충에 도입하는 것은 장내 미생물 기능을 검증하고 장내 미생물 - 숙주 상호 작용의 기초가되는 메커니즘을 밝히는 강력한 방법입니다. 항생제를 투여하거나 달걀 표면을 살균하는 것은 곤충에서 장내 박테리아를 제거하는 데 일반적으로 사용되는 두 가지 방법입니다. 그러나 곤충에 대한 항생제의 잠재적 인 부작용 외에도 이전 연구에 따르면 항생제를 먹이면 장내 박테리아를 제거 할 수 없다는 사실이 밝혀졌습니다. 따라서 세균이없는 인공 식단은 일반적으로 도끼 곤충을 유지하기 위해 사용되며, 이는 자연 식품의 영양 성분과 완전히 닮을 수없는 지루하고 노동 집약적 인 과정입니다. 여기에 설명 된 것은 잎 딱정벌레 (Plagiodera versicolora)의 축삭 유충을 준비하고 유지하기위한 효율적이고 간단한 프로토콜입니다. 특히, 딱정벌레 알의 표면은 멸균되었고, 그 다음에 세균이없는 포플러 잎이 도끼 유충을 후방하는 데 사용되었습니다. 곤충의 축삭 상태는 배양-의존적 및 배양-독립적인 검정을 통해 추가로 확인되었다. 종합적으로, 계란 소독과 무균 재배를 결합함으로써, 축삭 P. versicolora를 얻기 위해 효율적이고 편리한 방법이 개발되어 다른 잎을 먹는 곤충에게 쉽게 옮길 수있는 도구를 제공했습니다.

포유류와 마찬가지로, 곤충 소화관은 음식 소화 및 흡수를위한 공동입니다. 대부분의 곤충은 내장에서 번성하고 숙주¹이 제공하는 영양에 따라 사는 다양한 공생 박테리아를 가지고 있습니다. 장내 공생 공동체는 음식 소화 및 해독 2,3,4, 영양 및 개발 ^5,6,7, 병원균 및 기생충에 대한 방어 8,9,10,11, 화학 통신 ^12,13 및 행동 14^를 포함하여 곤충의 여러 생리 과정에 중대한 영향을 미칩니다. ^,

1. 곤충 사육

1. P. versicolora 개체군을 27 °C 및 70 ± 5 % 상대 습도의 조건에서 성장 챔버에 유지하고 16 h 빛 / 8 시간 어둠의 광주기로 유지하십시오. 타일 젖은 흡수 종이가있는 구멍이 뚫린 플라스틱 상자에 넣고 신선한 포플러 가지를 먹이십시오. 흡수 용지에 깨끗한 물을 뿌려 수분을 유지하고 이틀마다 가지를 바꿉니다.
2. 번식 후 산란을 위해 성인을 격리하십시오. ?.......

P. versicolora의 수명 단계는 그림 1에 나와 있습니다. 성인 남성은 성인 여성보다 작습니다(그림 1A). 들판에서, 딱정벌레는 잎에 알을 모은다. 여기에서는 잎에서 네 개의 알을 떼어냈다(그림 1B). 도끼 곤충 사육에 사용되는 포플러 줄기 세그먼트와 묘목은 그림 2에 나와 있습니다. 3^번째 인스타 ?.......

세균이 없는 유충을 제조하고 특정 박테리아 균주를 재도입하여 gnotobiotic 유충을 얻는 것은 숙주-미생물 상호작용의 기초가 되는 기전을 밝히는 강력한 방법이다. 새로 부화 한 유충은 두 가지 주요 방법으로 장내 미생물을 얻습니다 : 어머니로부터 자손으로의 수직 전달 또는 형제 자매와 환경으로부터의 수평 획득³⁴. 전자는 난자 표면(³⁵)의 오염을 통해 자손?.......

이 작품은 중국 국립 자연 과학 재단 (31971663)과 CAST (2020QNRC001)의 젊은 엘리트 과학자 후원 프로그램이 자금을 지원했습니다.