Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Representative Results
Discussion
Acknowledgements
Materials
References
Environment
माइक्रो-सीटी एक गैर-विनाशकारी उपकरण है जो तीन आयामों में पौधों की संरचनाओं का विश्लेषण कर सकता है। वर्तमान प्रोटोकॉल परजीवी पौधे संरचना और कार्य का विश्लेषण करने के लिए माइक्रो-सीटी का लाभ उठाने के लिए नमूना तैयारी का वर्णन करता है। विशिष्ट तैयारी के साथ युग्मित होने पर इस विधि के फायदों को उजागर करने के लिए विभिन्न प्रजातियों का उपयोग किया जाता है।
माइक्रो-सीटी स्कैनिंग संयंत्र संरचना और कार्य की जांच में एक स्थापित उपकरण बन गया है। इसकी गैर-विनाशकारी प्रकृति, त्रि-आयामी विज़ुअलाइज़ेशन और वर्चुअल सेक्शनिंग की संभावना के साथ मिलकर, जटिल पौधों के अंगों के नए और तेजी से विस्तृत विश्लेषण की अनुमति दी है। परजीवी पौधों और उनके मेजबानों के बीच सहित पौधों के बीच बातचीत का भी पता लगाया जा सकता है। हालांकि, स्कैनिंग से पहले नमूना तैयार करना इन पौधों के बीच बातचीत के कारण महत्वपूर्ण हो जाता है, जो अक्सर ऊतक संगठन और संरचना में भिन्न होते हैं। इसके अलावा, परजीवी फूलों के पौधों की व्यापक विविधता, अत्यधिक कम वनस्पति निकायों से लेकर पेड़ों, जड़ी-बूटियों और झाड़ियों तक, परजीवी-मेजबान सामग्री के नमूनाकरण, उपचार और तैयारी के दौरान विचार किया जाना चाहिए। यहां परजीवी और / या मेजबान पौधों में विपरीत समाधान पेश करने के लिए दो अलग-अलग दृष्टिकोणों का वर्णन किया गया है, जो हौस्टोरियम का विश्लेषण करने पर ध्यान केंद्रित करते हैं। यह अंग दो पौधों के बीच संबंध और संचार को बढ़ावा देता है। एक सरल दृष्टिकोण के बाद, हौस्टोरियम ऊतक संगठन के विवरण को तीन-आयामी रूप से खोजा जा सकता है, जैसा कि यूफाइटोइड, बेल और मिस्टलेटो परजीवी प्रजातियों के लिए यहां दिखाया गया है। विशिष्ट विपरीत एजेंटों और अनुप्रयोग दृष्टिकोणों का चयन करने से मेजबान शरीर के भीतर फैले एंडोपारासाइट के विस्तृत अवलोकन और परजीवी और मेजबान के बीच प्रत्यक्ष पोत-से-पोत कनेक्शन का पता लगाने की अनुमति मिलती है, जैसा कि एक बाध्यकारी जड़ परजीवी के लिए यहां दिखाया गया है। इस प्रकार, यहां चर्चा किए गए प्रोटोकॉल को परजीवी फूलों के पौधों की व्यापक विविधता पर लागू किया जा सकता है ताकि उनके विकास, संरचना और कामकाज की समझ को आगे बढ़ाया जा सके।
उच्च-रिज़ॉल्यूशन एक्स-रे माइक्रोकंप्यूटेड टोमोग्राफी (माइक्रो-सीटी) एक इमेजिंग विधि है जिसमें एक नमूने के कई रेडियोग्राफ (अनुमान) को विभिन्न देखने के कोणों से रिकॉर्ड किया जाता है और बाद में नमूना1 के आभासी पुनर्निर्माण प्रदान करने के लिए उपयोग किया जाता है। इस आभासी वस्तु का विश्लेषण, हेरफेर और खंडित किया जा सकता है, जिससे तीन आयामों में गैर-विनाशकारी अन्वेषण की अनुमति मिलतीहै। प्रारंभ में चिकित्सा विश्लेषण के लिए और बाद में औद्योगिक अनुप्रयोगों के लिए डिज़ाइन किया गया, माइक्रो-सीटीआक्रामक प्रक्रियाओं की आवश्यकता के बिना आंतरिक अंगों और ऊतकों की कल्पना करने का लाभ भी प्रदान करता है। इमेजिंग के अन....
पौधे के ऊतक कंट्रास्ट में सुधार के लिए भारी धातु समाधान का उपयोग माइक्रो-सीटी विश्लेषण के लिए नमूना तैयार करने में एक महत्वपूर्ण कदम बन गया है। पौधों की सूक्ष्म-आकृति विज्ञान प्रयोगशालाओं में आमतौर प?.......
सिमोन गोम्स फरेरा (माइक्रोटोमोग्राफी प्रयोगशाला, साओ पाउलो विश्वविद्यालय, ब्राजील) और डॉ ग्रेग लिन (सेंटर फॉर नैनोस्केल सिस्टम, हार्वर्ड यूनिवर्सिटी, यूएसए) को विभिन्न माइक्रोटोमोग्राफी सिस्टम और डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर के लिए उनकी सर्वोपरि सहायता और अपरिहार्य उपयोगकर्ता प्रशिक्षण के लिए धन्यवाद देना चाहता हूं। मैं कनेक्टिकट विश्वविद्यालय (यूएसए) में ईईबी ग्रीनहाउस के कर्मचारियों को भी धन्यवाद देता हूं, विशेष रूप से क्लिंटन मोर्स और मैथ्यू ओपेल को विस्कम न्यूनतम के नमूने प्रदान करने के लिए। जॉन वेनज़ेल ने पायरुलारिया पुबेरा के नमूने के लिए अवसर और बड़ी मदद प्रदान की। एमएससी कैरोलिना बास्टोस, एमएससी यास्मीन हिराओ, और तलिथा मोट्टा ने साइबलियम फंगीफ....
Name | Company | Catalog Number | Comments |
3D X-ray microscope (XRM) system | Zeiss Versa 620 | used to scan Pyrularia pubera | |
3D X-ray microscope + A2:D22 | Zeiss | Versa 620 | Used for scanning the species P. pubera |
CT-Pro 3D software | Nikon | version XT 3.1.11 | Used for three-dimensional reconstruction of scans |
CT-Vox software | Bruker | version 3.3.1 | Used for analyses and acquisition of images and videos |
Dragonfly software | Object Research Systems - ORS | version | Used for analyses and acquisition of images and videos |
Glass vials | Glass Vials Inc. SE | V2708C-FM-SP | Sold by VWR - USA; make sure that vials are able to withstand vacuum at ca. 10 psi |
Inspect-X | Zeiss | version XT 3.1.11 | Used for controlling the Nikon X-Tek HMXST225 system |
Iodine solution 0.0282 N | WR Chemicals BDH | BDH7422-1 | Sold by VWR - USA |
Lead Nitrate II PA 500 g | Vetec | 361.08 | Sold by SPLab |
Microtomography scanner | Bruker | Skyscan1176 | Used for scanning the species C. americana, S. martianus, and S. fungiforme |
Microtomography scanner | Nikon | X-Tek HMXST225 | Used for scanning the species V. minimum |
NRecon software | Bruker | version 1.0.0 | Used for three-dimensional reconstruction |
Phosphotungstic acid hydrate 3% in aqueous solution | Electron Microscopy Sciences | 101410-756 | Sold by VWR - USA |
Plastic film (Parafilm) | Heathrow Scientific | PM996 | Sold by VWR - USA |
Plastic IV bag 500 mL | Taylor | 3478 | Sold by Fibra Cirurgica Produtos para Saude |
PVC tubing 3/4'' | Nalge Nunc International | SC63013-164 | Sold by VWR - USA |
Scanning system | Nikon X-Tek HMXST225 | used to scan Viscum minimum | |
Scanning system | Bruker Skyscan 1176 | used to scan C. americana | |
Scout-and-ScanTM software | Zeiss | version 16 | Used for controlling the Zeiss Versa 620 system and for three-dimensional reconstruction of scans |
Three-way valve | ToToT | DMTWVS-5 | Sold by Amazon USA |
Two-part syringe | HSW Henke-Ject | 4850001000 | Used without the plunger |
Vacuum chamber | Binder | 80080-434 | Sold by VWR - USA; includes pump and connecting tubes |
VG Studio Max software | Volume Graphics | version 3.0 | Used for analyses and acquisition of images and videos |
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